动物组织蛋白提取.docxVIP

实验一 动物组织蛋白质的提取 【目的要求】 1、掌握动物组织蛋白质的提取方法。 2、了解动物组织蛋白质提取的原理。 【实验原理】 由于蛋白质种类很多，性质上的差异很大，即或是同类蛋白质，因选用材料不同，使用方法差别也很大， 且又处于不同的体系中， 因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同 的，大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中，少数与脂类结合的蛋 白质溶于乙醇、 丙酮及丁醇等有机溶剂中。 因此可采用不同溶剂提取、 分离及纯化蛋白质。蛋白质在不同溶剂中溶解度的差异， 主要取决于蛋白分子中非极性疏水基团与极性亲水基团的比例， 其次取决于这些基团的排列和偶极矩。 故分子结构性质是不同蛋白质溶解差异的内因。温度、 pH、离子强度等是影响蛋白质溶解度的外界条件。 提取蛋白质时常根据这些内外因素综合加以利用， 将细胞内蛋白质提取出来， 并与其它不需要的物质分开。 但动物材料中的蛋白质有些以可溶性的形式存在于体液 （如血浆、消化液等）中，可以不必经过提取直接进行分离。蛋白质中的角蛋白、 胶原及丝蛋白等不溶性蛋白质， 只需要适当的溶剂洗去可溶性的伴随物， 如脂类、糖类以及其他可溶性蛋白质， 最后剩下的就是不溶性蛋白质。蛋白质经细胞破碎后，用水、稀盐酸及缓冲液等适当溶剂，将蛋白质溶解出来，再用离心法除去不溶物，即得粗提取液。 本实验采用