Western blot的原理、操作及注意事项 .pdfVIP

Western blot 的原理、操作及注意事项 原理： 通过电泳区分不同的组分，并转移至固相支持物，通过特异性试剂（抗体）作为探针， 对靶物质进行检测，蛋白质的 Western 印迹技术结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定 的特异敏感等多种特点，可检测到低至 1～5ng （最低可到10－100pg）中等大小的靶蛋白。 一、抗原的选择和制备 A：样品的制备 1 组织： 组织的处理方法：组织洗涤后加入 3 倍体积预冷的 PBS，0℃研磨，加入 5×STOP buffer，180W，6mins，0℃超声波破碎，5000rpm，5mi