发酵过程控制技术 02-10发酵罐取样操作 引导文-发酵罐取样操作.doc

天津现代职业技术学院 PAGE 9 子情境：引导文 谷氨酸发酵过程控制—发酵罐取样操作 阅读材 阅读材料 材料一： 一、发酵培养方式有哪些？ 无论好氧与厌氧发酵都可以通过深层培养来实现，这种培养均在具有一定径高比的圆柱形发酵罐内完成，就其操作方法可分为以下几种： 分批式操作 半分批式操作 反复分批式操作 反复半分批式操作 连续式操作 （一）分批发酵法（batch fermentation） 概念：每一个分批发酵过程都经历接种、生长繁殖、菌体衰老进而结束发酵，最终提取出产物。 特点：微生物所处的环境是不断变化的，可进行少量多品种的发酵生产，发生杂菌污染能够很容易终止操作，当运转条件发生变化或需要生产新产品时，易改变处理对策，对原料组成要求较粗放等。 （二）补料分批发酵法（fed-batch fermentation） 概念：指在分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法。 优点：使发酵系统中维持很低的基质浓度。 低基质浓度的优点：①可以除去快速利用碳源的阻遏效应，并维持适当的菌体浓度，使不致于加剧供氧的矛盾。②避免培养基积累有毒代谢物。 补料分批发酵广泛应用于抗生素、氨基酸、酶制剂、核苷酸、有机酸及高聚物等的生产。 连续发酵的优缺点 连续培养方式的优点 连续培养方式的缺点 1、提供了一个微生物在恒定状态下高速生长的环境，便于进行微生物的代谢、生理、生长和遗传特性的研究； 2、在工业生产上可减少分批培养中每次清洗、装料、消毒、接种、放罐等的操作时间，提高生产效率。 3、中间及最终产物的生产稳定；由于系统化而产生综合效果；可以节省人力、物力、降低生产费用。 4、产物质量比较稳定。 5、可以作为分析微生物的生理、生态及反应机制的有效手段。 6、所需的设备和投资较少，便于实现自动化。 1、在长时间的培养过程中，微生物菌种容易发生变异，发酵过程易染菌； 2、新加入的培养基与原有的培养基不易完全混合，影响培养和营养物质的利用。 3、必须和整个作业的其他工序连续一致。 4、收率及产物浓度比分批法稍低。 5、有可能被杂菌污染及变异；诸因素对生物反应的影响和动力学关系不能充分解释。 （三）连续发酵法（continuous fermentation） 概念：连续发酵过程是当微生物培养到对数生长期时，在发酵罐中一方面以一定速度连续不断地流加新鲜液体培养基，另一方面又以同样的速度连续不断地将发酵液排出，使发酵罐中微生物的生长和代谢活动始终保持旺盛的稳定状态，而pH、温度、营养成分的浓度、溶解氧等都保持一定，并从系统外部予以调整，使菌体维持在恒定生长速度下进行连续生长和发酵，这样就大大提高了发酵的生长效率和设备利用率。 材料二： 讨论底物与产物形成的关系，可将微生物发酵分成了三个类型：第Ⅰ型生长偶联型；第Ⅱ型生长部分偶联型；第Ⅲ型--生长非偶联型。 1．偶联型 这类初级代谢产物的生产速率与生长直接有关，合成的产物通常是分解代谢的直接产物，在厌氧条件下，酵母菌生长和产物合成是平行的过程；在通气条件下培养酵母时，底物消耗的速度和菌体细胞合成的速度是平行的。这种形式也叫做有生长联系的培养。 2.非生长偶联型 细胞生长时，无产物，但细胞停止生长后，则有大量产物积累，产物的形成速度只与细胞积累量有关。 产物合成发生在细胞生长停止之后（即产生于次级生长），故习惯上把这类与生长无关联的产物称为次级代谢产物，但不是所有次级代谢产物一定是与生长无关联的。 e.g 柠檬酸、谷氨酸发酵等。即微生物生长和产物合成是分开的，糖既满足细胞生长所需能量，又充作产物合成的碳源。 但在发酵过程中有两个时期对糖的利用最为迅速，一个是最高生长时期，另一个是产物合成最高的时期。如在用黑曲霉生产柠檬酸的过程中，发酵早期糖被用于满足菌体生长，直到其他营养成分耗尽为止，然后代谢进入使柠檬酸积累的阶段，产物积累的数量与利用糖的数量有关，这一过程仅得到少量的能量。 3.混合型 生长与产物生成部分相关（如乳酸、柠檬酸、谷氨酸等的发酵）。 材料三： 取样方法： 一、材料准备 1 .“短管” 准备: 外径Φ12 的优质胶管(医药公司售)若干条。 每条长15 公分左右 每条两头都各用一层布和一层牛皮纸包扎好灾菌备用。(如图l ) 2 .“采样瓶” 准备: 用250 m l三角烧瓶若干个, 瓶塞用优质胶塞, 其上打两个Φ8 的孔, 并各插进Φ10 的玻璃管(每根6-8 厘米)玻管上套外径是Φ12 的优质胶管, 胶管的另一端则用一层纱布和一层牛皮纸包好。灭菌备用(如图2 ) 3.发酵罐的取样口准备: 改用Φ10的铁管或铜管, 套上外径Φ12 的优质胶管。在实消后, 把取样阀关紧, 同时要把其上的胶管用止血钳夹紧(如图3 ) 二、取样操作 1.先把发酵罐取样口胶管上的