高效液相色谱法鉴定人参原料.pdf

高效液相色谱法鉴定人参原料 K S BIO 资料 高效液相色譜法鑒定人參原料 湖南省疾病预防控制中心理化检验科 赖天兵 (2003.03.01) 在保健食品的报批检验工作中，曾遇到过这样一个产品，配方中注明有黄芪、 人参等原料，用比色法测得该产品中人参皂甙的含量高达 1.5%；但采用高效液 相色谱法分析，并未检测出各人参皂甙单体的含量。后经调查发现，厂家并未在 产品中加入人参原料—— 　　 人参皂甙作为人参类保健食品的功效成分已得到广泛的认同。目前该类保健 食品中主要添加的是白参粉、红参粉、西洋参、人参提取物及茎叶皂甙等。茎叶 皂甙与红参、白参、西洋参的功效相差甚远，但因其价格亦相差甚远，所以某些 只考虑经济利益的生产厂家便在原料上以次充好，以茎叶皂甙或绞股蓝等代替人 参。而目前在人参类保健食品的检测中被普遍采用的比色法，往往会造成检测结 果的假阳性，不能准确判别产品所用之原料。另外，许多植物原料如三七、酸枣 仁、黄芪、桔梗、柴胡等，均含有各种结构的皂甙，因此，采用比色法来检测产 品、尤其是复配方产品中人参皂甙的含量是非常不妥当的。　　 采用高效液相色谱法（HPLC）可同时分析其中的人参二醇及人参三醇皂甙， 并根据分析所得的皂甙图谱判别产品所用人参原料的种类。　　 例如，应用 HPLC 对红参、白参、西洋参及茎叶皂甙进行分析，在图谱上可 明显看出各样品间的差异：　　 红参与白参的 6 种皂甙图谱较为相似，但二者最大的差异在于 R 与 R 之间 e g1 的比例——白参R 含量明显高于 R ，而红参则恰恰相反 （这是由于白参在制成 e g1 红参的加工过程中受热导致结构转化），这一含量特征可用于判别红参与白参； 西洋参和茎叶皂甙的皂甙图谱与人参有着明显差异，特别是在人参二醇型皂 甙部分（R ，R ，R ，R ）； b1 b2 c d 白参、红参中均存在 Rf，而西洋参中无此成分。　　 因此，采用 HPLC 鉴定人参原料，可有效控制人参类保健食品的产品质量， 防止伪劣产品流入市场。　　 具体实验方法如下： 一、试剂 1.实验用水：去离子水。 2.乙腈：色谱纯，200nm，吸光度值为 0.021。　　 3.甲醇：分析纯。　　 4.正丁醇：分析纯。　　 5.高效液相色谱流动相：梯度淋洗 A 液为乙腈，B 液为水。　　 6.人参皂甙 R 、R 、R 、R 、R 、R 标准品（自制）：含量大于 98% e g1 b1 c b2 d （HPLC）。　　 7.人参皂甙 R 、R 、R 、R 、R 、R 标准溶液：配制人参皂甙 R 、R 、 e g1 b1 c b2 d e g1 R 、R 、R 、R 标准储备液，浓度均为 10mg ／mL；再以此储备液配制成混合标 b1 c b2 d 准系列溶液，浓度范围为 0.1mg ／mL～1mg ／mL；所有标准溶液均用甲醇配制。 二、仪器设备 1.高效液相色谱仪（Waters 公司）：双高压输液泵，附紫外检测器。　　 2.超声波清洗器。　　 第 1 页 高效液相色谱法鉴定人参原料 3.离心机。　　 三、分析步骤 提取回收率考察：对于固体样品，采用超声提取时，通过考察提取时间发现， 提取时间在 30 分钟以上，提取完全，通过加标回收实验，在以水饱和正丁醇提 取时，回收率分别是R 　：98.2%； R ：98.7%；R ：98.1%；R ：