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昆虫杆状病毒杀虫剂 昆虫杆状病毒 昆虫杆状病毒是一类专门寄生节肢动物 的病原微生物。其宿主特异性高，一种病毒 往往只感染一种或几种近缘昆虫，不感染脊 椎动物。因此，这类病毒对人、畜及环境安 全，且病毒粒子被包埋在蛋白质晶体内使其 十分稳定，作为杀虫剂在虫害的生物防治中 具有很大的经济效益和生态效益。 昆虫杆状病毒 昆虫杆状病毒基因组大小为 80 ～ 180kb ， DNA 分子呈超螺旋双链闭合环 状。其病毒粒子是由杆状核衣壳和包 被它的 2 层脂蛋白囊膜所组成，而核衣 壳则包括蛋白质衣壳和病毒 DNA 分子与 碱性蛋白构成的髓核。在感染宿主细 胞后能够产生 2 种表型的病毒：一种是 包涵型病毒，另一种是芽生型病毒。 包涵型病毒主要进行昆虫之间的感染 传播，而芽生型病毒则负责昆虫体内 感染的扩散。 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 我国的昆虫病毒防治开始于 1973 年 左右 , 蒲蛰龙等在广东首次发现马尾松 毛虫质多角体病毒 ( DpCPV ) 。 1988 - 1993 年间 , 在湖北、新疆、河南、河北 等省利用松毛虫 CPV 病毒防治松毛虫 , 总计面积约 7 万 hm 2 , 其防治效果相当于 当前的高效化学农药。 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 马尾松毛虫 马尾松毛虫质型多角体病毒 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 另一项应用广泛的病毒是棉铃虫 NPV 病毒。 20 世纪 70 年代 , 我国产棉区广泛开展了利用棉铃虫 NPV 防治棉铃虫的田间试验 , 并在湖北兴建了第一 座国家投资建设的年产能力为 30t 的棉铃虫 NPV 制 剂工厂。 武汉大学刘年翠等 (1978) 开始对菜粉蝶颗粒体病 毒 (PrGV) 进行了系统深入的基础和应用研究。该制 剂在我国 29 个省市、 216 个单位进行了 1.33 万 hm 2 田间试验 , 标志着昆虫病毒杀虫剂应用研究和产业化 基本模式已经形成。 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 棉铃虫 棉铃虫杆状病毒 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 菜粉蝶（菜青虫） 菜粉蝶颗粒体病毒 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 戴冠群等 (1973) 在广州地区首次分 离到斜纹夜蛾核型多角体病毒 (PINPV) 后 , 中山大学昆虫学研究所与广州市中 达生物工程有限公司合作 , 于 1998 年生 产出商品化的 “虫瘟一号”病毒杀虫 剂 , 杀虫效果良好 , 年产量达 30t 以上。 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 斜 纹 夜 蛾 多 角 体 病 毒 斜 纹 夜 蛾 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂 野生型昆虫杆状病毒杀虫剂具有对人畜、环境 安全，且不产生严重抗性的优点，但是其缺点也很 明显。首先是杀虫谱狭窄，相对于化学农药的广谱， 其一般只对几种昆虫起作用，如家蚕病毒 （ BmNPV ）不感染柞蚕，而柞蚕病毒（ ApNPV ） 也不感染家蚕，有些病毒虽然也交叉感染，但其对 其他宿主的感染毒力显著降低。其次是潜伏期长， 杀虫速度缓慢。其对害虫的田间致死时间一般需 7 ～ 14 d ，而不像化学农药那样快速杀灭害虫。 重组型昆虫杆状病毒杀虫剂 杆状病毒进化生物学研究结果表明杆状病毒具 有共同的起源。从这个共同的祖先开始，杆状病毒 的差异程度随着病毒基因组上的许多单基因或基因 片段的获得或缺失不断增大。 随着分子生物学研究的不断深入，为了克服野 生型昆虫杆状病毒杀虫剂的缺点，科学家开始尝试 各种分子生物学改造以获得重组昆虫杆状病毒。 重组型昆虫杆状病毒杀虫剂 近年来，这方面的研究主要集中在以下几 个方面： ⑴修饰病毒本身基因以提高杆状病毒的感染力 ; ⑵在杆状病毒基因组中插入外源基因以增强病 毒毒力（研究较多） ; ⑶用异源病毒重组来扩大杆状病毒杀虫谱。 ⑴修饰病毒本身基因 ? e.g. 缺失 egt 基因 ?? egt 基因是杆状病毒在个体水平调控感染宿主生长发育 的唯一已知基因。缺失 egt 基因的重组病毒可引起幼虫生长 发育代谢的失调 , 加速感染虫体的死亡。 OReily 等 (1991) 发现银纹夜蛾核多角体病毒的一个早期 非必需基因蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖转移酶基因 , 该基因 受早期启动子控制 , 编码的一个 506aa 蛋白能阻止幼虫蜕皮 和化蛹 , 促进病毒自身的增殖。缺失该基因的重组病毒能比 野生型病毒提早 27.5h 杀死粉纹夜蛾幼虫 , 受感染的幼虫取食 量也减少了 40% 。 ⑵插入外源基因 e.g. 插入植物蛋白酶抑制剂基因 植物蛋白酶抑制剂基因编码的植物蛋白酶抑制 因子作为植物抵抗害虫的天然防御体系 , 近年来已 引起人们的注意。季平等 (1996) 把慈姑蛋白酶抑制 剂 B 基因插入家蚕 BmNPV 基因组中 , 获得了带慈姑 蛋白酶抑制剂 B 基因的重组家蚕 BmNPV 。重组病毒