遗传学实验人群中ptc味盲基因频率的分析.docxVIP

人群中PTC味盲基因频率的分析 摘要 通过实验掌握人群中PTC味盲基因频率的分析方法，加深对群体遗传学中遗传平衡定律的认识。 引言 苯硫脲（phenythiocarbamide , PTC） 是一种白色结晶状化合物 ,其结构由于有 N-C=S 基团（硫化酰胺基）而呈苦味对人无毒，在不同人群中对该物质的尝味能力不同。 这种尝味 能力是由一对等位基因 （T.t）所决定其中 T对t为不完全显性。基因型为 TT,能尝出 1/6000000 — 1/750000 的 PTC的苦味；Tt 基因型，能尝出 1/480000 —1/380000 溶液的苦味， 基因型为tt，能尝出1/24000以上浓度PTC的苦味。极个别体甚至对 PTC的结晶也尝不出， 这类个体在遗传学上称为 PTC味盲。尝味者为 AD,味盲者为AR。PTC尝味能力的调查在研 究人类群体遗传学、种族学方面有其科学价值 ;亦可作为双生子、亲子鉴定的简便易行的方 法之一。 将PTC配制成各种浓度的溶液， 由低浓度到高浓度逐步测试学生的尝味能力， 由此可 区分出味盲（隐性纯合体）、高度敏感（显性纯合体）和介于二者之间的人（杂合体） 。据此 可对人群中味盲基因的频率进行分析。 哈迪一温伯格定律也称遗传平衡定律， 是由英国数学家哈迪 （G.H.Hardy）和德国医生温 伯格分别于1908年和1909年各自提出的。 两个等位基因的哈迪一温伯格定律的公式为： （p+q）2=p2+2pq+q2=1。 其中p代表一个等位基因（如 A）的频率，q代表另一个等位基因（如 a）的频率，p2 代表一个等位基因纯合子 （如AA）的频率，q2代表另一个等位基因纯合子 （如aa）的频率， 2pq代表杂合子（如 Aa）的频率。 实验材料 2.1实验材料 苯硫脲（phenythiocarbamide , PTC） 、试剂瓶、一次性塑料吸管。 2.2实验方法 2.2.1溶液的配置 取PTC粉末0.65克，加蒸馏水500ml，在室温下溶解，原液浓度 1/750，为1号液。取 原液100ml，用蒸馏水稀释1倍，为2号液。取2号液100ml，蒸馏水稀释1倍为3号液。 以此类推。直到 14号液，为1/6000000。尝味能力在1-6之间的为tt型，7-10之间的为 Tt型，11-14之间的为TT型。 2.2.2味觉测试 每人按浓度由低到高依次尝味，记录基因型。 测试时，让受试者正坐，仰头张口伸舌，用滴管滴4?6滴14号液于受试者舌根部，让 受试者慢慢咽下尝味，然后用蒸馏水做同样的试验。 询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道。若不能鉴别或鉴别不准 ，则依次用13号、 12号溶液重复试验，直到能明确鉴别出 PTC的苦味为止。 当受试者鉴别出某一号溶液时 ，应当用此号溶液重复尝味 3次，3次结果相同时，才 是可靠的，并记录首次尝到 PTC苦味的浓度等级号。如果受试者直到 1号液仍尝不出苦味， 则其尝味浓度等级定为 1号。 在测定时，注意用蒸馏水交替给受试者尝味 ，避免受试者的臆意猜测而影响结果的准 确。 2.2.2数据处理 根据一个实验班的测定结果，求出基因 T、t的频率，并应用X2检验去确定实验班这个 群体是否为平衡群体。 基因频率的计算方法：通过获得的不同基因型的数目或基因型频率求得。 基因频率=群体中某个座位的特定等位基因的拷贝数 /群体中该座位所有等位基因数 p=f (T) = ( 2XTT+Tt) / (2X N) , ( N为个体总数) q=f (t) = ( 2X tt+Tt ) / (2X N) 两个等位基因的频率，f(T)和f(t) 一般以p和q来表示。一个座位上的基因频率相加 总是等于1,因此一旦计算出了 q，那么p=1-q。 3.结果 1、实验结果数据统计 基因型 TT Tt tt 人数 2 28 3 2、基因频率的计算： 对所测得的数据，根据哈代温伯格定律: T 基因频率：p = (28 + 2 X 2) /2 X (2+28+3) = 0.485 t 基因频率：q = (3 X 2 + 28) /2 X (2+28+3) = 0.515 3、 平衡群体基因型频率的计算 按哈代温伯格定律公式：p2+2pq+q2=1,得： TT: p2=0.485*0.485=0.235 Tt: 2pq=2*0.485*0.515=0.500 tt:q2=0.515*0.515=0.265 2 4、 卡方(x )检验 假设我们所在班级的群体是一个遗传平衡群体， 检测各基因型的理论预期值与实际测得 值之间的吻合程度进行验证。可用 x 2检验。如下: PTC尝味能力的x 2检验 TT Tt tt 总计 实际频(O) 2 28 3 33 理论频(C) 2 (Np) (N2pq) 2 (Nq ) N 7.755 16.500 8.