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散斑竹根七的组织培养与快速繁殖体系的建立?农学论文
散斑竹根七的组织培养与快速繁殖体系的建立
蒋天仪唐敏1,阳淑1,王波2,石大兴3
(1?成都农业科技职业学院,成都 61113 0 ; 2 .四川工程职业技 术学院,四川德阳618000;
3?四川农业大学林学院,四川 雅安625014)
摘要:以散斑竹根七[Disporopsis a s p e r a (Hua) Eng l.ex Krause]的嫩茎段作为外植体,研究了其组织培养和快 速繁殖体系。结果表明,夕卜植体预处理后,经过7 5 %的乙醇消毒2 Os,再 用0 .1% H g C 1 2处理6 m i n的灭菌效果最好启动率达到7 8 .40% , 污染率仅为2 3 . 7 5 %。初代培养最适宜的培养基是M S + 6 - B A 1.0 mg/ L + 2 z 4 - D 0.01 mg / L + NAA 0.1 mg / L + I AA 1.0 mg / L ; MS + 6?BA 0.5 mg / L + K T 1.5 mg / L + NAA 0.2 mg / L + I B A 1.0 mg / L适用于继代增殖培养,丛 生芽的增殖系数达到6?10 ;适宜生根的培养基为NAA 1 . 0 mg / L + I BA 0.5 mg/L + l/ 2MS/生根率达到9 6. 13%o
关键词:散斑竹根七[Disporopsis a s p e r a (Hua) E n g 1 . e x Krause];组织培养;快速繁殖体系
中图分类号:Q943.1 文献标识码:A 文章编号:0439
? 8114 ( 2 0 15 ) 16 - 4070-03
D01:10.14088/ki.issn0439-8114.2015.16.062
收稿日期:2015?03?25
基金项目:四川省重点学科建设项目(S ZD04 1 9 )
作者简介:蒋天仪(1 9 8 2?女,四川成都人,讲师,硕士 ,主要从
事观赏园艺植物的研究,(电话)028 电子信箱)1 2 845958@。
散斑竹根七[Disporopsis a s p e r a (Hua) Eng
1 . e x Krause ]是百合科竹根七属植物,为多年生草本[1 ],其叶厚 纸质,花黄绿色,具紫色斑点,花被钟状[2 ],春季开花,花朵俯垂,枝形优
美。该种原产于林下、阴蔽山谷或溪边,是一种耐阴性很好的植物,可应用于风 景林地下或建筑边缘物作地被植物,也可盆栽观赏[3 L地被植物在园林中的
应用量一般很大,快速繁殖是满足园林应用的一个方面,而工厂化生产是保证苗 木整齐的另一个方面。目前,工厂化生产种苗的公司并不多,专业生产地被植物 的更少[4 , 5 L
1材料与方法
1.1试验材料
散斑竹根七植株采自四川省雅安市的周边山上,采回后种植于苗圃,选在5 月取材,剪取3 ~ 4 c m的带芽茎段作为夕卜植体。
1?2试验方法
1.2.1夕卜植体表面灭菌将外植体在加有洗衣粉的洗涤液中浸泡1 0 mi n,接着用自来水冲洗2~3次,然后放入7 5%乙醇中处理20 s后用 无菌水冲洗3次,再用0 . 1% HgC 1 2溶液分别处理3、6和9 min, 期间不停地振荡,最后使用无菌水冲洗5次。每处理接种2 0个外植体,重复3
次,灭菌后的外植体接入启动培养基先暗培养7 d ,再进行光照培养(12 h
/d )z 3 5 d后统计启动率和污染率。
1?2 . 2初代培养将处理好的带芽嫩茎段作为外植体进行接种,基本 培养基为MS。设置基本培养基MS,加入6?B A( 0、0?5、1?0、2.0 mg / L 1 2 , 4 ?D(O.O:L、 0.05、 0.1、 0.5 mg / L 1 NAA(0、 0.05、 0.1、 0.5 mg / L )和:EAA( 0、 0.1、 0.5、1 . 0 mg / L );共1 6个处理。每处理接种1 0株外植体,重复3 次,培养3 0 d观察统计芽启动率。
1.2.3继代增殖培养将初代培养获得的茎段丛生芽切割为带1个芽 的小块,转接到继代增殖培养基上,以M S为基本培养基,加入6?B A( 0?5、 1.0、 2 . 0 mg / L I K T ( 0.5、 1.0、 1.5 mg / L X NA A ( 0 . 0 lx 0.1、 0.2 mg / L )和:EBA( 0.1、 0.5、 1.0 mg / L ),共12个处理。每个处理接种2 0株外植体,重复3次,40 d后 统计增殖系数及有效苗数。
1?2 . 4生根培养 在增殖培养中选取高约3 cm的健壮丛生芽,切 割成单苗,接种于生根培养基中,基本培养基为MS,加入NAA( 0.1、
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