DB51T 2301-2016 溶血性曼氏杆菌PCR检测方法.pdf

ICS 65.020.30 B 41 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 2301—2016 溶血性曼氏杆菌 PCR 检测方法 2016 - 12 - 20 发布 2017 - 01 - 01 实施 四川省质量技术监督局 发 布 DB51/T 2301—2016 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 设备与试剂 1 5 DNA 提取 2 6 PCR 扩增 2 7 PCR 产物的电泳检测 3 8 结果判定 3 9 废弃物无害化处理 3 附录 A（规范性附录） 相关试剂配制 4 附录 B（规范性附录） 溶血性曼氏杆菌的培养 5 I DB51/T 2301—2016 前 言 本标准附录A、附录B为规范性附录。 本标准依据 GB/T 1.1-2009 给出的规定进行编写。 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准发布。 本标准起草单位：西南民族大学。 本标准主要起草人：杨发龙、岳华、张焕容、汤承、张斌、任玉鹏、王远微。 II DB51/T 2301—2016 溶血性曼氏杆菌 PCR检测方法 1 范围 本标准规定了牛、羊溶血性曼氏杆菌的PCR（聚合酶链式反应）检测方法。 本标准适用于溶血性曼氏杆菌核酸的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法。 GB 16548 病害动物和病害动物产品生物安全处理规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 溶血性曼氏杆菌 （Mannheimiahaemolytica） 一种属于巴斯德氏菌目、巴斯德氏菌科、曼氏杆菌属的细菌，可引起牛等动物流行性肺炎的病原。 4 设备与试剂 4.1 主要仪器设备 4.1.1 PCR 扩增仪。 4.1.2 电泳仪。 4.1.3 水平电泳槽。 4.1.4 凝胶成像系统。 4.1.5 冷冻高速离心机。 4.1.6 微量高速离心机（适合于对 PCR 反应管进行离心操作）。 4.1.7 高压灭菌器。 4.1.8 恒温水浴锅。 4.1.9 移液器。 4.1.10 -20 ℃冰箱。 4.1.11 超纯水仪。 4.2 主要试剂 4.2.1