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六、 E.coli 环状染色体 Hfr H thr pro lac pur gal his gly thi Hfr1 thr thi gly his gal pur lac pro Hfr2 thr pro thi gly his gal pur lac Hfr3 pur lac pro thr thi gly his gal E.coli 的染色体。上图表示因子处于染色体上的不同位点;下图表示 高频重组时基因转移的先后顺序不同 Hfr 品系 最早的 最晚的 转移顺序 Hfr 品系 H Hfr 品系 1 Hfr 品系 2 Hfr 品系 7 转化的机制 ? 七 . 重组频率的计算 ( 一 ) 等级传递绘图 1956 年 Wollman,Jacob 和 Hayes Hfr H thr + leu + azi s lac + gal + (λ) + str + mal + mtl + F - thr - leu - azi r lac - gal - (λ) - str – mal – mtl - mal : maltose 麦芽糖 mtl : mannitol 甘露醇 Leu + arg + met + arg + met + arg + met + met + met + met + 图 8-15 根据自然转移的梯度所预期的受体片断的分配 ( 二 ) 中断杂交作图 (interrupted matingexperiment) 1961 年 Jacob 和 Wollman 供体: Hfr H str s thr + leu + azi r ton r lac + gal + 受体: F - str r thr leu azi s ton s lac - gal - 表 8-5 Hfr × F - 中断杂交中不同时间非选择标记标记的重组率 各非选择标记标记的重组频率(%) thr + 取样时间 (分) leu + azi s ton s lac + gal + 5 0 0 0 0 0 10 100 12 3 0 0 15 100 70 31 0 0 20 100 88 71 12 20 40 100 90 75 38 20 ( 1 )不同的非选择标记进入受体且重组 的时间不同,但都是稳定的; ( 2 )各基因的重组频率随着时间的增加 而增加,直至极值; ( 3 )按时间顺序,先重组和后重组的基 因,重组率的极值在逐步减少; 0 5 10 15 20 25 ( 分钟 ) 起点 thr ,leu azi ton lac gal 图 8-13 利用中断杂交进行 E.coli 染色体作图 ( 三 ) 重组作图- E.coli 染色体连锁图 ? 部分二倍体 ( partial diploid ) ? 部分合子 ( merozygote )也称 半合子
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