实验方案与预期结果.docxVIP

通过RNA芯片检测25例听神经瘤的基因突变 实验目的： 发现更多由于PCR技术局限而检测不到的潜在基因突变点，并通过比较不 同听神经瘤之间的生物学行为，研究基因突变与肿瘤生物学性状之间的关系。 实验方案： 1） RNA提取：从25例病人的新鲜听神经瘤组织中提取 RNA ； 2） cDNA转换：提取出来的RNA逆转录成cDNA，并通过PCR技术扩增 3） 杂交与RNA芯片检测：RNA芯片含mRNA全序列，通过核酸分子杂交原理 进行核酸序列分析的，芯片上已知序列的核酸探针通过碱基互补配对来检测 分析未知序列，并通过计算机处理杂交信号来确定基因突变点。具体实验流 程详见公司材料说明书。 第3步可能的原理：铺瓦式阵列（Tiled Array）是一种常用的用于检测突变位点 的阵列，其设计原理可以下列说明：为了检测待测cDNA序列5 - TCAGCATXGCCATCG中X位点，可以使用下面四个 RNA探针： 3-AGTCGTAACGGTAGC 3-AGTCGTAGCGGTAGC 3-AGTCGTACCGGTAGC 3-AGTCGTATCGGTAGC 用这四个探针与待分析序列同时杂交 ，严格控制杂交条件，那么完全互补探针的 杂交信号最强，从而可以确定X位点。 （参考文献：DNA芯片技术及其在突变检测中的应用） 4） 检测结果分析：通过RNA芯片技术得到的基因突变点，结合之前 PCR后基 因测序实验获得的NF2基因突变，确定其他基因的突变情况。 5） 比较：根据25例听神经瘤组织的生长速度、囊性变否、肿瘤大小进行及基因 突变的情况分类比较研究基因突变与肿瘤生物学性状之间的关系 预期结果 经RNA芯片检测出现大批的基因突变点,听神经瘤的突变基因不局限于 PCF检 测的NF2基因，如P16 TNF A（ 1-3）、DCC等基因均可发现较多突变点。（参 考文献：反向点杂方法检测听神经瘤基因突变 ）。不同的基因突变点与不同的肿 瘤生物学性状之间的关系，还需进一步研究。 世间最近与最遥远的距离，来自于心灵与心灵。相遇了，可以彼此陌生，人在咫尺心在天涯，也可初见如旧，眼光交汇的那一刻，抵得人间万般暖。 世间最近与最遥远的距离，来自于心灵与心灵。相遇了，可以彼此陌生，人在咫尺心在天涯，也可初见如旧，眼光交汇的那一刻，抵得人间万般暖。 是相视的莞那是心与心的交汇, 尔一笑，是一杯饮了半盏的酒，沉香在喉，甜润在心。 是相视的莞 红尘中，我们会相遇一些人，一些事，跌跌撞撞里，逐渐懂得了这世界，懂得如何经营自己的内心，使它柔韧，更适应这风雨征途，而不会在过往的错失里纠结懊悔一生。 时光若水，趟过岁月的河，那些旧日情怀，或温暖或痛楚，总会在心中烙下深深浅浅的痕。生命是一座时光驿站，人们在那里来来去去。一些人若长亭古道边的萋萋芳草，沦为泛泛之交； 一些人却像深山断崖边的幽兰，只一株，便会馨香满谷。 人生，唯有品格心性相似的人，才可以在锦瑟华年里相遇相知，互为欣赏，互为懂得，并沉淀下来，做一生的朋友。 试问，你的生命里，有无来过这样一个人呢？ 张爱玲说 因为懂得，所以慈悲”. 于千万人群中，遇见你要遇见的人，没有早一步，也没有晚一步，四目相对，只淡淡的问候一句：哦！原来你也在这里，这便足够。