水稻早熟基因显性抑制基因的遗传分析和分子标记定位概要.docVIP

文章编号 :049026756(2003022******* 水稻早熟基因显性抑制基因的 遗传分析和分子标记定位 蒋佩琪 1,淳泽 1,2,邓晓建 1,3,杨志荣 1 (1.四川大学生命科学学院 ,成都 610064;2.中国科学院成都生物研究所 ,成都 610041; 3.四川农业大学水稻研究所 ,成都 611130 摘要 :将明恢 63,9311,IR68,献国和 B G1639 等 5 个迟熟水稻品种与早籼核不育 系 6442S 27杂交 ,对 F 1,F 2 代以及三交 F 1 群体进行抽穗期遗传分析 .结果表 明 ,9311,IR68,献国和 B G1639 等 4 个迟熟品种含有 1 对等位的显性抑制基因 ,可部分地抑制 6442S 27显性早熟基因的表达 .以 6442S 27∥明恢 63/9311 三交 F 1 群体为定位群体 ,利用微卫星标记将该抑制基因定位于水稻第 8 染色体短臂上 .该抑制基因 命名为 S u 2Ef 2cd (t ,并认为该基因对于利用 6442S 27早熟基因来培育不同熟期的 早熟和中早熟品种具有重要意义 .关键词 :水稻 ;早熟基因 ;显性抑制基因 ;微卫星标记 中图分类号 :Q31111+2 文献标识码 :A 生育期是水稻的重要农艺性状之一 ,它主要决定于品种的感光性、感温性和基本营养生长性 .通过对水稻感光性品种和非感光性品种生育期的遗传研究 ,迄今已发 现 17 个水稻感光主基因及其 4 个修饰基因 [1~3],10 个非感光主基因及其 2 个修饰基因 ,以及 1 份不完全显性早熟性材料 [1,4~7],并通过传统方法和分子标记方法将部分基因进行了定位 [2,3,5,7].除了感光基因和非感光基因本身影响水稻抽穗期外 ,感光 基因之间、非感光基因之间和感光基因与非感光基因之间互作 [2,8~10],以及各种修 饰基因都起到很大的作用 .在已研究过的 6 个修饰基因中 ,有 2 个感光抑制基因 [11,12]、2 个感光增强基因 [13,14]以及 2 个分别增强和减弱显性早熟基因位点 Ef 21 早熟效应的隐性非感光修饰基因  [4],但还未见早熟基因的显性修饰基因的报道  .我们 通过研究发现 ,9311,IR68,献国 ,B G1639 等 4 个迟熟品种中有一对等位的显性抑制基 因 ,能部分地抑制早籼核不育系 6442S 27早熟基因的表达 .同时 ,利用微卫星标记进行基因定位 ,以期为 6442S 27显性早熟基因在水稻遗传改良中的应用以及该显性抑制基因的分离克隆奠定基础 . 材料和方法 1.1 材料 6442S 27为具有显性早熟特性的早籼核不育系 ,已用分子标记定位了它携有的 一个显性早熟基因 Ef 2cd (t [5,6] .9311,IR68,献国 ,B G1639 和明恢 63 均为中籼迟熟品种 . 1.2 方法 1.2.1 田间实验 将 6442S 27与上述 5 个迟熟品种杂交 ,在四川成都自然长日 条件下播种亲本和 F 1 代,每 个各种植 20 株.同时 ,播种 F 2 代以及三交 F 1 代等分离群体 .隔日逐株观察记载 始穗期 ,以每株主穗抽出 1cm 作为该株始穗的标准 ,以播种到始穗的天数作为抽穗 期 .1.2.2 定位群体的构建和总 DNA 的提取 从 6442S 27∥明恢 63/9311 三交 F 1 代群体中选取早熟植株 116 株和迟熟植株 116 株组成定位群体 ,分单株取叶片提取 总 DNA. 同时 ,在此基础上随机选取早熟和迟熟植株收稿日期 :2002212218 2003 年 4 月第 40 卷第 2 期四川大学学报 (自然科学版 Journal of Sichuan University (Natural Science Edition Apr.2003Vol.40 No.2 各 10 株,每个单株各取等量叶片 ,将早熟和迟熟单株叶片分别混合 ,提取总 DNA 作为早熟和迟熟近等基因池 .总 DNA 提取参照 McCouch 等的方法 [15] 进行 . 1.2.3 微卫星标记分析 按照 Temvykh 等提供的微卫星序列合成引物 [16].PCR 扩增产物在 3%~4%的琼脂糖凝胶中电泳 ,经溴化乙锭染色后在紫外灯下观察拍照 . 1.2.4 目标基因的遗传作图星标记的分离数据进行连锁分析  用 ,利用  MAPMA KER 软件对定位群体抽穗期和微卫 K osambi 函数将重组率转化为遗传距离 (cM. 表 1 2001 年亲本及其杂交后代在自然长日条件下的抽穗期分布 (4 月 11 日播 种 亲本及其杂交后代 抽穗期分组 858789919395979910110310510710911111311