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临床检验操作规程
第一节 临床血液学检验
血常规检查
抗凝静脉血(有些仪器也可用末梢血) 。
血液细胞自动分析仪测定法。
血液细胞自动分析仪配套试剂。
详见自己实验室血液细胞自动分析仪使用手册。
血常规包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、 红细胞比积、血小板计数等项目。这些项目亦有相应的手工方法,详 见有关资料。
半自动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉 血。其优点为:
1)静脉血能正确地反映病人实际情况,重复性好; 2)利于延长仪器的使用寿命; 3)解决了采血盘的交叉感染问题等。
3.血细胞计数应用 EDTA K2:为抗凝剂(EDTA K2 2 H2O 1.5 2.2mg 可抗凝 1ml 血)。
4. 贮血容器应选用有盖塑料管。抗凝血采集后在室温中贮存应
不超过6h;如需制作血涂片应在2h内完成。
5.测定前必须将EDTA K2抗凝血充分混匀。
6.血细胞分析仪测定最适温度为 18?22 C,低于15 C或高于 30 C,均可使细胞体积发生改变,影响各参数的结果。
7. 血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段,当白细
胞、红细胞、血红蛋白和血小板的任何一项有明显
升高或降低;白细胞分类出现异常结果(中间细胞群百分率》 8.0% );
红细胞、白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形等情况, 须 用显微镜检查及分类。
嗜酸性粒细胞直接计数
池。
末梢血或抗凝静脉血。
直接计数法。
1. Hinkelmann 液;
2. 乙醇 - 伊红稀释液;
3. 伊红 - 丙酮稀释液。
作】
1 .小试管中加稀释液 0.38ml 。
2.常法取末梢血 20ul ,加入管内混匀,待红细胞溶解后两侧充
3.静置3?5min,用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数 10
个大方格内嗜酸性粒细胞数。总数X 20 X106二嗜酸性粒细胞/L。
1. 血液稀释后应于 1 h 内计数完毕。
2. 充池前要充分混匀,但又不宜用力过猛。
3. 住院病人采集标本时间力求统一,以免受日间生理变化的影
响。
红细胞沉降率测定
标本
抗凝静脉血。
方法
魏氏法。
试剂
109mmol/L 枸橼酸钠溶液。
作】
3mm xiOOmm试管1支,在2ml容量处刻上记号,加抗凝剂 0.4ml。
静脉采血后,取下针头,加血至刻度,旋转混合。
3.用血沉管(300mm X2.5mm )吸取上述混匀血液至0 刻度
处,拭去管外附着的血液,将管垂直立在血沉架上。
4.记时,室温中静置1h,观察血浆高度,以红细胞下沉的毫米
数报告之。
红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量与质,血浆 中脂类的量和质, 红细胞的大小与数量, 是否成串钱相聚以及血沉管 的内径、清洁度、放置位置是否垂直,室温高低等因素都有关系。
标本采集时应空腹。
血液和抗凝剂的比例要准确。
4. 血沉管内径要标准( 2.5mm ),放置要垂直。
5. 做血沉的标本要在采集后 3h 内测定,并充分混匀。
6. 室温过低、过高和贫血时,对结果有影响。为此,血沉应尽 量放在18~25 C室温下测定。室温过咼时血沉加快,可以按温度系
数校正。室温过低时血沉减慢,无法校正。
网织红细胞计数
末梢血或抗凝静脉血。
百分计数法。
10g/L 煌焦油蓝生理盐水溶液或 10g/L 煌焦油蓝 ACD 溶液。
于小试管中滴加 1 滴煌焦油蓝生理盐水溶液或煌焦油蓝 ACD
溶液。
加入末梢血或静脉血 2 滴于上述试管中,混匀。
3. 静置 15 ? 20min 后,取用 1 滴制成薄片。
油镜下检查 1000 个红细胞中网织红细胞数, 以百分率或绝对 值报告。
1.活体染色时间不能过短,室温低时,放 37C温箱。
2. 网织红细胞也可用 Miller 窥盘计数法、荧光染色或流式细胞 仪计数。
嗜碱性点彩红细胞计数
末梢血
百分计数法。
试剂
甲醇;
碱性亚甲基蓝染液(保存 2?3周)。
1. 按常法制成薄血片,自然干燥后,用甲醇固定 3min 。
2. 用碱性亚甲基蓝染液染色 1 ? 2min ,水洗待干。
用油镜计数 1000 个红细胞中嗜碱性点彩红细胞数, 以百分率 报告。
1. 用碱性亚甲基蓝染液染色后,红细胞呈浅蓝绿色,嗜碱性点 彩呈深蓝色。
2. 也可用瑞氏染色,嗜碱性点彩呈蓝黑色。
由于点彩红细胞分布不匀,必要时扩大计数红细胞数。
第二节 体液及排泄物检查
尿液检验尿常规检查
新鲜尿液。
化学试带法。
各型号尿液化学分析仪配套试带。
详见自己实验室的尿液化学分析仪使用手册。
尿常规检查使用尿液化学分析仪,目前能进行 8?10项检测
(PH、蛋白、葡萄糖、酮体、隐血、尿胆红素、尿胆素原、亚硝酸
盐、比重、白细胞)。这些项目亦有相应的手工方法,详见有关资料。
必须了解所用试带各膜块注意事项、药物干扰
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