微生物真题加考研微生物新7-病毒-上-zzm.ppt

7.1 概述一、病毒的发现及研究历程 1884年，法国微生物学家查理斯·尚柏朗发明了一种细菌无法滤过的过滤器（尚柏朗过滤器，其滤孔孔径小于细菌的大小），他利用这一过滤器就可以将液体中存在的细菌除去。 一、病毒的发现及研究历程 1892年，俄国生物学家德米特里·伊凡诺夫斯基在研究烟草花叶病时发现，将感染了花叶病的烟草叶的提取液用尚柏朗过滤器过滤后的滤液依然 一、病毒的发现及研究历程 1899年，荷兰微生物学家马丁乌斯·贝杰林克重复了伊凡诺夫斯基的实验，观察到这种病原只在分裂细胞中复制，没有显示这种病原的颗粒形态，因此他称之为contagium vivum fluidum（可溶的活菌）并进一步命名为virus（病毒）。 （后来证明在细胞外是颗粒） 一、病毒的发现及研究历程 20世纪早期，英国细菌学家Frederick Twort发现了可以感染细菌的病毒，并称之为噬菌体。随后法裔加拿大微生物学家Felix d‘Herelle描述了噬菌体的特性：长满细菌的琼脂固体培养基上，噬菌体导致细菌死亡而留下的空斑。通过计算空斑的数量，再乘以稀释倍数就可以得出溶液中病毒的个数，揭开了现代病毒学研究的序幕。 一、病毒的发现及研究历程 1906年，哈里森发明了在淋巴液中进行组织生长的方法 ； 1913年，E. Steinhardt、C. Israeli和R. A. Lambert利用这一方法在豚鼠角膜组织中成功培养了牛痘苗病毒，突破了病毒需要体内生长的限制。 1928年，H. B. Maitland和M. C. Maitland利用母鸡肾脏悬液对牛痘苗病毒进行了培养。他们的方法在1950年代得以广泛应用于脊髓灰质炎病毒疫苗的大规模生产。 一、病毒的发现及研究历程 1935年，美国生物化学家和病毒学家温德尔·梅雷迪思·斯坦利得到烟草花叶病毒晶体，将病毒成功地分离为蛋白质部分和RNA部分（1946年的诺贝尔化学奖）。 1941年， Bernal和Fankuchen拍摄到第一个被结晶的病毒。 1955年，通过分析病毒的衍射照片，罗莎琳·富兰克林揭示了病毒的整体结构。同年，Heinz Fraenkel-Conrat和罗布利·威廉姆斯发现将分离纯化的烟草花叶病毒RNA和衣壳蛋白混合在一起后，可以重新组装成具有感染性的病毒，这也揭示了这一简单的机制很可能就是病毒在它们的宿主细胞内的组装过程。 一、病毒的发现及研究历程 20世纪的下半叶是发现病毒的黄金时代，大多数能够感染动物、植物或细菌的病毒在这数十年间被发现。 1957年，马动脉炎病毒和导致牛病毒性腹泻的病毒被发现； 1963年，发现了乙型肝炎病毒； 1965年，霍华德·马丁·特明发现并描述了第一种逆转录病毒； 1970年鉴定出逆转录酶。 1983年，法国吕克·蒙塔尼耶等首次分离得到艾滋病毒（HIV）。 二、病毒的特点和定义 病毒是由蛋白质和核酸构成的一类具有化学大分子属性和生物体基本特征，又具有细胞外感染性颗粒和细胞内繁殖性基因形式的十分独特的生物类群。 形态极其微小,必须在电镜下才能观察,一般都具滤过性; 无细胞构造，故称“分子生物”； 其主要成分仅是核酸和蛋白质两种; 每一种病毒只含一种核酸,不是DNA就是RNA;核酸可以以单链或双链形式存在； 既无产能酶系,也无蛋白合成系统; 个体极小，可以通过滤菌器，形态多样。普通光镜下不可见，形态大小以nm计。有球状、杆状、复合型。 病毒与单细胞微生物性质比较 由一个或数个RNA或DNA分子构成的感染性因子，通常（非必须）覆盖由一种或数种蛋白质构成的外壳，有的外壳还有更复杂的膜结构；这些因子能将其核酸从一个宿主传递给另一个宿主细胞；能利用宿主酶系统进行细胞内的复制；有些病毒还能将其基因整合入宿主DNA，依靠这种机制，或是导致持续性感染发生，或是导致细胞转化，肿瘤形成。 卫星病毒（satellite virus）和朊病毒（prion）等是特殊感染性因子。 一、病毒的分离与纯化 1.病毒的分离 标本的采集与处理 注意采集标本种类和采集时机； 破碎释放、低温等进行处理. 标本接种与感染表现 噬菌斑、空斑、枯斑。 感染效价计算： 设0.1ml的稀释度为10-6的病毒悬液可产生75个噬斑， 则：PFU/ml=(75PFU/0.1ml) ×106=7.5 ×108 ◆ 毒粒是一团能够自主复制的遗传物质，它们被蛋白质外壳所包围，有的还具有包膜，以保护遗传物质免遭环境破坏，并作为将遗传物质从一个宿主细胞传递给另一个宿主细胞的载体。 ● 毒粒的形态结构 ● 毒粒的化学组成 TMV: 18×300 nm，含有2130个同型亚基，其长度取决于核酸，其宽度取决于蛋白亚基。 病毒的基本结构： 包 膜(envelope) (2)