电镜样品的制备.pptxVIP

第一节 扫描电镜样品的常规制备技术 腔形器官 菌类和组培细胞 一、取材 即：获取观察材料。 1.迅速准确： 取材动作要快，部位要准确。 方法：因材料而异，通过破碎、解剖、切割、 分离、提纯等手段，获取样品最佳观察面。 2.动作轻巧：保护好拟观察面。 解剖器械要锋利，不能对材料施加锯、挤、拉压 的外力。含水分多的、幼嫩材料最好冷冻断裂法。 3.厚度小： 满足观察条件的最小体积，厚度为1~2毫米 4.纯净防混杂： 花粉、孢子类样品注意防尘、防混杂 5.悬浮液样品要求合适的浓度： 浓度太大造成样品堆积；浓度小则检出困难。 二清洗：确保得到清洁的观察表面 1.完整的制样程序中有三次清洗 固定前清洗：洗去表面的灰尘、黏液等附着物， 确保获得清洁的观察表面。 前固定后清洗：洗净醛类固定液，以免戊二醛与锇酸 反应而削弱锇酸的固定效果。 脱水前的清洗：洗净固定液，以免固定液与脱水剂 反应而产生沉淀，影响观察效果。 2.清洗液的类型与选择：蒸馏水、生理盐水、加酶清洗液等 选择原则：清洗液的pH值、渗透压、温度应该尽量接近样品的生理值，以免样品因环境突变而导致形态变化。 植物材料：蒸馏水洗净尘埃； 动物材料：等渗生理盐水、5%碳酸钠或缓冲液洗去黏液等； 游离细胞：用等渗的缓冲液清洗(精子、血细胞、微生物)； 覆盖大量黏液的样品(胃黏膜)用低浓度的蛋白水