生物竞赛生物化学dna转录顶级资源生物化学原理第二三张.pptxVIP

第三十六章DNA转录提纲DNA转录的一般特征依赖DNA的RNA聚合酶细菌的DNA转录转录的起始转录的延伸转录的终止真核生物的DNA转录真核细胞核转录系统与细菌转录系统的异同真核细胞核DNA的转录古菌的DNA转录中心法则-“一个中心（DNA），两个基本点（RNA和蛋白质”DNA 转录与DNA复制的比较与DNA复制的共同性质 1) 需要模板、解链和解除转录过程中形成的正超螺旋 2) 只能按照5′→3′的方向进行 虫草素可以证明此。与DNA复制不同的性质 1)不需要引物 2) NTPs 代替dNTPs; UTP代谢dTTP 3) 缺乏校对活性（错误率在1/104 ~1/105 nts） 4) 发生在特定的区域（不是所有的DNA序列） 5) 对于一个特定的基因而言，只有一条链转录 记住一些名称——模板链（无意义链，Watson链）和编码链（有意义链，Crick链）证明DNA复制从5′→3′的实验编码链，有意义链， Crick 链模板链，无意义链， Watson 链转录翻译细菌RNA聚合酶 第一种被发现的合成核酸的酶是多聚核苷酸磷酸化酶（PNP ） 1955年， Marianne Grunberg-Manago和Severo Ochoa 首先报道一种催化RNA合成的酶。Ochoa因此和Arthur Kornberg荣获1959年的诺贝尔医学、生理学奖真正的大肠杆菌RNA聚合酶 1960年，由四个独立的研究小组（Sam Weiss，Jerard Hurwitz，A. Stevens 和J. Bonner）几乎同时从大肠杆菌中得到 。此酶需要模板，使用4种 rNTPs为底物，合成和模板链互补的序列，需要Mg2+.RNA聚合酶共同的性质 -DNA模板：一条链被转录 -底物：GTP, CTP, UTP, ATP -二价金属离子：Mg2+ 与DNA聚合酶之间的主要差别 RNA聚合酶与DNA聚合酶的差别RNA聚合酶只有 5′→3′的聚合酶活性，无5′-外切酶或3′-外切酶的活性。RNA聚合酶缺乏 3′-外切酶的活性是转录忠实性不如复制的主要原因；RNA聚合酶本身就能促进DNA双链解链；RNA聚合酶催化转录的从头合成，不需要引物；RNA聚合酶与进入的NTP上的2′-OH有多重接触位点；RNA聚合酶在转录的起始阶段，DNA分子会形成皱褶，以使在发生无效转录时，仍然能与启动子结合；在转录过程中，转录物与模板解离，而在复制中，DNA聚合酶上开放的裂缝允许DNA双链从酶分子上伸展出来；RNA聚合酶在转录的起始阶段受到多种调节蛋白的调控；RNA聚合酶的底物是NTP，而不是dNTP，由UTP代替dTTP；RNA聚合酶启动转录需要识别启动子；RNA聚合酶的反应速度低，平均值只有50nt/秒。 细菌RNA聚合酶的结构与功能所有的三类RNA由同一种RNA聚合酶催化 大肠杆菌的RNA聚合酶大小为465 k，含有2 ?, 1 ?, 1 ?′, 1 ?, 1ω亚基 全酶核心酶：2 ?, 1 ?, 1 ??, 1ω 抑制剂：利福霉素和利链霉素大肠杆菌RNA聚合酶全酶的组成及其功能分工亚基基因大小（k）每一个酶分子中的数目功能α亚基β亚基β′亚基ω亚基σ70因子RopARopBRopCRopZRopD36151155117021111聚合酶的组装，转录的起始，与调节蛋白的相互作用转录的起始和延伸DNA结合在体外为变性的RNA聚合酶成功复性所必需启动子的识别a1a2RNA聚合酶全酶启动子特异性的转录起始bb’a a2 a2b a2bb’ = 核心酶a1a2bb’s70s70s32s60正常生长(主要的条件下) 热休克(应急条件下) N饥饿(应急条件下) 核心酶的组装(w亚基是组装效率提高)核心酶无序列特异性,非特异性转录起始+σ 因子可以互换的,启动子识别抗σ因子抗σ因子能够与内源的σ因子形成复合物，而抑制σ因子的功能.Rsd是一种抗σ70 因子。它并不存在于对数生长期的大肠杆菌细胞.然而，如果大肠杆菌进入稳定期，Rsd合成 以后，阻断σ 70 的活性，从而使σS 与核心酶结合，启动稳定期阶段的基因表达。枯草杆菌孢子发生的控制涉及抗σ因子和抗抗σ因子！Taq RNA聚合酶核心酶的三维结构真核细胞的RNA聚合酶真核细胞的RNA聚合酶出现了功能分工，不同性质的RNA由不同的RNA聚合酶催化转录，其细胞核具有三种RNA聚合酶，即RNA聚合酶I、II、和III，三者也分别被称为RNA聚合酶A、B和C，它们分别催化细胞核内的rRNA（5S rRNA除外）、mRNA和小RNA（tRNA和5SrRNA）的转录。除此以外，线粒体和叶绿体也含有RNA聚合酶。 原核生物与真核生物的RNA 聚合酶在三维结构上的比较RNA聚合酶 II 抑制剂白毒伞含有有毒的环状十肽——鹅膏蕈碱这种蘑菇口