elisa原理及实验操作.pptVIP

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  • 2021-04-18 发布于浙江
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Elisa 简介 酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),简称ELISA,基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。 原理:受检标本(测定抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。 加入酶反应 的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本 中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。 优点:由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法 达 到高的敏感度。 分类:直接 elisa、间接 elisa、夹心 elisa、竞争抑制 elisa 直接 elisa 亲和纯化的单抗包被在酶标板上,封闭后加入酶标分型二抗,最后加底物显色即可。 这种ELISA中只经过了一步信号放大(酶的放大),所以其灵敏度不是很高,另外其测定的对象也非常有限,只能测定酶标记的分子。 可用于检测抗原和抗体。 间接 elisa 间接ELISA 中与包被好的抗原结合的不是酶标抗体,而是非酶标的,再引入二抗(酶标)与一抗特异性结合,最后加入底物显色并判读结果。 二抗一般为多抗,一个一抗分子上可以结合多个二抗分子,同时一个二抗分子上可以标记上多个酶分子,所以当待测抗体为多抗时(可以由多个一抗分子与抗原结合

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