2021年福建专升本无机与分析化学第十一章吸光光度分析法.doc

第十一章 吸光光度分析法 一、概述 吸光光度法:根据物质对光选取性吸取而建立起来分析办法。 重要有: 红外吸取光谱：吸取光波长范畴2.5~1000 mm ,重要用于有机化合物构造鉴定。 紫外吸取光谱：吸取光波长范畴200~400 nm（近紫外区） ，可用于构造鉴定和定量分析。 可见吸取光谱：吸取光波长范畴400~750 nm ，重要用于有色物质定量分析 1、光性质 光是一种电磁波。 可见光：人眼睛能感觉到波长范畴在400～760 nm光 单色光：只具备一种波长光 互补色光：如果将两种恰当颜色单色光按一定强度比例混合，可以得到白光，普通将这两种颜色单色光 2、物质对光选取性吸取： 当一束白光通过某溶液时，如果溶液对各种颜色光均不吸取，则溶液是无色；如果溶液只吸取了白光中一某些波长光，而别的光都透过溶液，则溶液呈现出透过光颜色即呈现出吸取光互补色光颜色 例如，CuSO4溶液选取性地吸取了白光中黄色光而呈现蓝色；KMnO4溶液选取性地吸取了白光中绿色光而呈现紫红色。 3、吸取光谱 物质光吸取曲线或吸取光谱: 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到曲线 最大吸取波长（maximum absorption）： 相应于光吸取限度最大处波长称最大吸取波长，以λ最大或λmax表达 由图可见： 在可见光范畴内，KMnO4水溶液对不同波长光吸取状况不同 四条曲线最大值均出当前525 nm波长处，即KMnO4水溶液最大吸取波长λmax = 525 nm，不随浓度变化而变化，且不同浓度KMnO4水溶液吸取光谱形状是完全相似。 不同浓度同种物质溶液，在一定波长处吸光度随溶液浓度增长而增大。 二、光吸取基本定律 1、朗伯一比耳定律 透光率或透光度T :透过光强度It与入射强度I0之比 T=It/I0 溶液透光率愈大，表达它对光吸取愈小；相反，透光率愈小，表达它对光吸取愈大。 吸光度A定义为： A=lg（I0/It）=lg1/T=-lgT 显然，A大，则吸取限度大，A小则吸取限度小。 朗伯一比耳定律：当一束单色光通过具有吸光物质溶液后，溶液吸光度与吸光物质浓度及液层厚度成正比 其数学表达式： A=kbc A为吸光度；b为液层厚度，单位是cm；c为溶液浓度；k为比例常数，它与入射光波长、有色物质性质和溶液温度等关于。 2、吸光系数与摩尔吸光系数 当c单位为g·L-1时，比例常数k以a表达，称为吸光系数，单位为L·g-1·cm-1 此时，朗伯比尔定律变为 A=abc 当c单位为mol·L-1时，k以ε表达，称为摩尔吸光系数,单位为L·mol-1·cm-1 这时，朗伯比耳定律变为： A=εbc 例 有浓度为1.6′10-5 mol·L-1有色溶液，在430 nm处摩尔吸光系数为3.3′104 L·mol-1·cm-1，液层厚度为1.0 cm，计算其吸光度和透光率 解： 例 用邻二氮菲光度法测定铁。已知Fe2+浓度为1 000 μg·L-1，液层厚度为2.0 cm，在波长510 nm处测得吸光度为0.38，计算摩尔吸光系数。 解： 三、分光光度计 分光光度计重要构成部件： 光源 6～12 V钨丝灯 单色器 由狭缝、色散元件及透镜构成 吸取池（也称比色皿） 由光学玻璃或石英玻璃制成（紫外光必要采用石英池） 检测器 有硒光电池、光电管、光电倍增管 显示记录系统 四、偏离朗伯-比耳定律 非单色光引起偏离； 介质不均匀引起偏离； 因吸光物质离解、缔合等导致偏离 五、测量条件选取 选取适当入射波长 最大吸取波长 控制恰当读数范畴 0.2～0.8 选取恰当参比溶液（空白溶液） 若样品溶液、试剂、显色剂均无色时，可用溶剂作参比（溶剂空白）；若显色剂或其他试剂是有色，应选用不加待测液试剂溶液作参比（试剂空白）；如果试剂是无色，而被测试液中存在其他有色离子，则选用不加显色剂被测试液作参比（试液空白） 六、显色反映及其影响因素 1、显色反映 显色反映：将被测组分转变成有色化合物反映 显色剂：显色反映中所加入试剂 2、影响显色反映因素 显色剂用量 吸光度A与显色剂用量CR关系会浮现如图所示几种状况。选取曲线变化平坦处。 溶液酸度 在相似实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液吸光度。选取曲线中吸光度较大且恒定平坦区所相应pH范畴 显色温度 显色时间 溶剂 加入适量有机溶剂或用有机溶剂萃取，可以使有色化合物颜色加深，提高显色反映敏捷度