螺旋体、衣原体、真菌、病毒.pptVIP

2021/5/7 医学微生物学实验 第六次实验 螺旋体 衣原体 真菌 病毒 实验目的 掌握螺旋体的形态特征及Fontana镀银染色法 了解衣原体的检测方法 掌握真菌的基本形态，熟悉真菌的菌落特征 掌握乙肝病毒表面抗原检测的ELISA方法 实验内容 螺旋体 钩端螺旋体的镀银染色片(示教) 口腔中螺旋体检查(个人操作) 衣原体的检测(免疫层析法) (操作示教) 真菌 白念珠菌革兰氏色标本片(示教) 白念珠菌的假菌丝和厚膜孢子(示教) 白念珠菌的芽管 (示教) 新生隐球菌的荚膜(示教) 真菌的菌落形态的观察(示教) 乙肝病毒表面抗原的检测(ELISA法)(小组) 一、螺旋体 1.属于原核细胞型微生物 2.分类： 疏螺旋体属：奋森氏螺旋体 密螺旋体属：梅毒螺旋体 钩端螺旋体属：钩端螺旋体 3.染色： Fontana镀银染色（菌体呈棕褐色） 梅毒螺旋体 Fontana镀银染色，菌体非常细小，弯曲，螺旋状，呈棕褐色，有紧密螺旋。 钩端螺旋体 Fontana镀银染色，镜下可见棕褐色两端有钩的螺旋体，菌体整齐，粗细均匀，呈“C”或“S”型，螺旋不明显。 口腔奋森螺旋体检测 取牙垢少许+生理盐水混匀制片。 室温干燥 加固定液，固定1~2分钟，用水冲洗。 加媒染液，加温至有蒸汽出现，作用30秒，水洗。 加硝酸银染液，加温至有蒸汽出现，染30秒。水洗，待干镜检。 镜下螺旋体呈棕褐色。 二、衣原体 1.是一类能通过细菌滤器，严格细胞内寄 生，有独特发育周期的原核细胞型微生物。 2.对人致病的主要有： 沙眼衣原体 肺炎衣原体 鹦鹉热衣原体 沙眼衣原体抗原检测（乳胶免疫层析法） 原理： 系用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和兔抗鼠IgG多克隆抗体分别固定于固相硝酸纤维素膜，并和乳胶标记的另一抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂和原料制成，应用乳胶免疫层析技术，采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法，用于女性宫颈和男性尿道中沙眼衣原体抗原的检测。 测试线（T线） (AbⅡ) 控制线（C线） (抗AbⅠ) 胶体垫 (AbⅠ) 吸水滤纸 样品垫 NC膜（硝酸纤维素膜） 层析方向 PVC底板 Ag 试纸条组成结构 9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。**** 标本 Gold test control 结果判定说明 阳性结果：出现质控线和反应线两条紫红色线，实验结果为阳性。 阴性结果：仅出现一条紫红色质控线，实验结果为阴性。 无效：不出现质控线红线或仅出现一条反应线红线，实验结果为无效结果，应重试。 阳性 阴性 沙眼衣原体抗原检测（免疫层析法） 操作步骤： 将棉拭标本浸没在含5滴提取液的提取管中并搅动。 将带有棉拭标本的提取管放入80℃水浴箱加热10-20分钟。 取出提取管，按压棉拭以去除其上的液体，然后丢弃棉拭。静置至少5分钟。 取出一个试剂板，在标本窗滴上5滴提取液，15分钟内在结果窗观察结果。 三、真菌 真菌：有细胞壁、典型细胞核，不含叶绿素，不分根、茎、叶的真核细胞型微生物。细胞质内有完整的细胞器。 特性：种类多、分布广 与人类的关系：大多对人无害，有的对人类有益。与医学有关的真菌达百余种，可引起人类感染性、中毒性及超敏反应性疾病 (一)真菌的形态与结构 单细胞真菌：圆形或卵圆形 多细胞真菌：菌丝和孢子， 丝状菌 交织成团，称菌丝体或霉菌 1.菌丝 hypha 2.孢子 spore 类酵母型真菌：产生假菌丝 酵母型真菌：不产生菌丝 营养菌丝 菌丝 气生菌丝（生殖菌丝） 大分生孢子 无性孢子 分生孢子 小分生孢子 （病原性） 叶状孢子 芽生孢子 关节孢子 孢子