血液rna提取办法.docx

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2021-06-23 发布于广东
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文件编码（TTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-0089）文件编码（TTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-0089）血液RNA提取办法血液RNA提取方法取新鲜的血液（紫管），加入3倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，10,000rpm离心1分钟。彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1mlTRIzol。室温放置5min，使样品充分裂解。 4℃12,000rpm离心10分钟，取上清（）。每1mlTRIzol加入200μl氯仿，剧烈振荡混匀后室温放置3-5min，自然分相。 4℃12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA主要在水相中，把水相转移到新管中（小心吸取水相）在上清中加入等体积冰冷的异丙醇（），室温放置10-20min。 4℃12,000rpm离心10min，弃上清，RNA沉淀于管底。 RNA沉淀中加入1ml75%乙醇（用RNase-free水配制，），温和振荡离心管，悬浮沉淀。 4℃5,000-8,000rpm离心1-2min，弃上清。室温放置1-2分钟晾干沉淀。沉淀中加入50-100μlRNase-free水，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存。检测纯度和浓度（OD260/OD280在2.0左右）赠送常用精致线性可编辑小图标