实验3细胞凝集反应.pptxVIP

实验三 细胞凝集反应;【实验目的】 1、了解细胞膜的表面结构； 2、掌握凝集素促使细胞凝集的原理;【实验原理】 细胞质膜是脂双层镶嵌蛋白质的动态流动结构，蛋白质和脂类分子又与寡糖链结合为糖蛋白和糖脂分子，糖蛋白和糖脂分子伸至细胞表面的分枝状糖分子在质膜表面形成细胞外被（又称为糖萼）。研究表明：细胞间的分子识别、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生等均与细胞外被（分枝状寡糖链）有关。; 凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素与细胞外被的寡糖链相连接，在细胞间形成“桥”的结构，使细胞发生凝集。 加入与凝集素互补的糖分子可以抑制细胞间的凝集反应。 凝集素与糖分子的结合具有专一性和结合价;【实验用品】 1、显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管； 2、试剂 (1) PBS缓冲液：称取NaCl 7.2g、Na2HP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸馏水，定容至l000 ml中，调pH值到7.2； (2) 1%肝素溶液：0.1g肝素钠定容至l0 ml生理盐水中 3、材料 2%的兔红细胞；土豆块茎；;【实验步骤】 2% 兔红细胞悬液制备 以无菌方法抽取兔子耳缘静脉血液0.5 ml，用4 ml 生理盐水洗3次，每次2000 r/min，离心5 min，最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐水配成2％红细胞悬液 。 2. 血球凝集现象的观察 称取土豆去皮块茎2g，切成小块；加10 ml 的PBS缓冲液，浸泡2 h（浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素）； 载玻片上滴一滴土豆凝集素，再滴一滴2％红细胞液 ，充分混匀； 静置20 min； 低倍显微镜下观察血球凝集现象 ； 以PBS液加2％血细胞悬液作为对照，低倍显微镜下观察 ;鸡血细胞凝集反应;1、描述你所观察到的细胞凝集反应现象，并分析影响细胞凝集反应的因素。 2、绘图表示血细胞的凝集过程与原理。