细胞毒理学实验细胞遗传毒性检测.pptVIP

加入少量低渗液，用剪刀将骨充分剪碎，并用吸管吹打，使骨髓细胞全部释放出来。 学习文档 用滤网将获得的液体过滤到离心管中，加低渗液至8ml左右室温下静置20-30分钟，进行低渗。低渗结束后，加入1mlCarnoy固定液进行预固定（5分钟左右），轻轻混匀后，离心。 学习文档 1200转/分，离心5分钟，弃上清，加入固定液6ml，混匀后，室温固定30分钟，再次离心去上清，重复固定一次，离心后，根据沉淀的体积向沉淀中加入0.5-1ml预冷的固定液（甲醇：冰醋酸=1：1），将细胞重悬。 学习文档 预冷的玻片 学习文档 滴片后，须将片子晾干，再滴加适量Giemsa染液染色10-15分钟，弃去染液，水洗，镜检。 学习文档 结果显示 有丝分裂指数（mitoticindex）：某一分裂组织或细胞群中，处于有丝分裂M期的细胞数占其总细胞数的百分数。 分裂相细胞数 有丝分裂指数 = ———————— 细胞总数 学习文档 实验组 对照组 有丝分裂指数 平均值 取秋水仙素不同剂量组染色体制片，各随机选取3-5个视野，统计各视野内的有丝分裂指数，并可对结果进行统计学分析（独立样本T检验），比较两组数据有无显著性差异。 学习文档 小鼠骨髓细胞微核显示 学习文档 实验注意事项 小鼠解剖残渣不要放入下