感染性疾病的诊断课件教学课件.ppt

第三篇 应用篇 分子诊断以DNA、RNA和蛋白质为材料，通过应用分子生物学技术，检查基因的存在、结构缺陷或表达异常，从而对人体状态和疾病作出诊断。 着重介绍感染性疾病、遗传性疾病、复杂疾病等的分子诊断基本策略和方法。 分子诊断的临床意义在于不仅能够对疾病作出早期诊断、确切诊断，而且还能确定个体归于疾病的易感性以及疾病的分期分型、疗效监测、预后判断等。随着分子诊断学的发展，分子诊断的原理和方法不仅适用于遗传性疾病，而且也广泛应用于感染性疾病、肿瘤等医学领域。 从生物中心法则来看，分子诊断包括检测基因的结构异常和基因表达异常。常见的分子诊断方法如下： DNA mRNA 蛋白质 转 录 反转录 翻 译 PCR DNA测序 Southern-blot 基因芯片 基因结构异常 基因表达异常 RT-PCR FQ-PCR Nothern-blot 基因芯片 ELISA Western-blot 组织化学染色 蛋白质芯片 中心法则 检测方法 第十四章感染性疾病的分子诊断 生物化学与分子生物学学科 2011.4 第一节 概 述 感染性疾病：由某种病原体所致，通过不同方式引起人体发生感染并出现临床症状的疾病。 病原体：病毒、细菌、原虫、支原体、 衣原体、立克次体。 常规检测方法： 免疫学方法 微生物学方法 受敏感性、特异性限制，不易早期诊断，并且不易提供病原体分型及耐药性方面的信息。 分子生物学方法： 聚合酶链式反应（PCR） 核酸杂交 基因芯片 早期、特异地进行诊断，能提供病原体分型及耐药性方面的信息，同时进行大量基因的检测。 一、感染性疾病的分子诊断，其诊断策略可以分为以下两种： 一般性检出策略，即只需要提供是否有某种病原体的感染； 完整检出策略，即不仅对病原体做出诊断，还要进行分型（包括亚型）和耐药性方面的检测。 1. 一般性检出策略和方法 针对特异性的核酸序列进行核酸分子探针杂交，或者利用常规PCR技术直接检出微生物的DNA/RNA，它能够判断有无感染和是何种病原体感染。 9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2021-7-112021-7-11Sunday, July 11, 2021 10、低头要有勇气，抬头要有低气。2021-7-112021-7-112021-7-117/11/2021 10:28:10 AM 11、人总是珍惜为得到。2021-7-112021-7-112021-7-11Jul-2111-Jul-21 12、人乱于心，不宽余请。2021-7-112021-7-112021-7-11Sunday, July 11, 2021 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2021-7-112021-7-112021-7-112021-7-117/11/2021 14、抱最大的希望，作最大的努力。2021年7月11日星期日2021-7-112021-7-112021-7-11 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。2021年7月2021-7-112021-7-112021-7-117/11/2021 16、业余生活要有意义，不要越轨。2021-7-112021-7-11July 11, 2021 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。2021-7-112021-7-112021-7-112021-7-11 2. 完整检出策略和方法 按照诊断→分型→亚型→耐药性检测的思路，利用多种分子诊断手段对感染性病原体进行分析。 基因芯片、基因测序等 二、感染性疾病分子诊断的常用方法 根据目的基因是否被放大， 可分为杂交法和扩增法。 信号放大技术检测方法 靶分子数目不变，而检测的探针信号放大 采用多酶、多探针或二者结合等方法来增加探针标志物的浓度使检测信号得到放大。 靶分子扩增技术检测方法 靶分子（RNA、DNA或探针）的扩增 PCR、替代扩增、LCR等 分支链DNA信号放大技术(bDNA) nucleic acid sequence-based amplification (NASBA) Figure 1. Target generation scheme for SDA. This figure depicts the initial steps in an SDA reaction which transform the original target sequence into the amplification