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第九章 发酵工程下游技术发展及发酵液的预处理;下游加工过程的重要性。(组成、费用和关注程度);第一节 发酵工程下游技术发展
一、发酵产物的分类
从工业发酵范畴来看,从发酵液中获得的发酵产物大致可分为三类 :
1、菌体:
2、酶:
3、代谢产物;二、下游加工技术的特点;;四、生物工业下游技术的发展历程 ;以20世纪40年代出现的青霉素产品为代表。
无菌空气制备技术、大型好氧发酵装置开发,一大批通风发酵技术产品相继投入了工业生产,如抗生素(链霉素)、氨基酸(谷氨酸)、有机酸(核酸、柠檬酸)、酶制剂(淀粉酶)、微生物多糖和单细胞蛋白等。产品多样性决定了分离方法的多样性。借鉴和引进吸收了大量的近代化学工业的分离技术,如沉淀、离子交换、萃取、结晶等。;以20世纪70年代末崛起的DNA重组技术及细胞融合技术为代表。
生物技术在其主要领域:基因工程、酶工程、细胞工程和发酵工程取得了长足进步,一批高附加值的产品开始面世,如乙肝疫苗、干扰素、功能因子、低聚糖、活性肽、高度不饱和脂肪酸等。生物技术在深度和广度上都取得了很大的进展。很多企业开始加强在生物工业下游技术领域的研究开发力量,不断推出新技术、新产品、新装备,以抢占更多的市场。新技术有超临界CO2萃取技术、膜过滤、渗透蒸发技术、各种色谱(层析)技术等。;20世纪80年代以来,生物工业下游技术进步很快,出现了很多新概念、新技术、新产品和新装备。大致可分为以下几大类:;已开发出珠磨破碎、高压匀浆法、 X-press法和化学破碎等技术。该技术的成熟使得胞内代谢产物的大规模工业化生产成为可能。;小分子物质一般可通过离子交换、脱色和结晶、重结晶等方法获得纯度很高的产品。生物大分子的纯化一直是个难题。20世纪70年代以来,逐渐开发出各种色谱(层析)技术,如亲和色谱、疏水色谱、聚焦色谱、离子交换色谱和凝胶色谱等,后两种技术已开始用于批量生产。;(5)其他新型分离技术;五、发酵工业下游技术的一般工艺过程;1. 一般工艺过程;下游加工一般工艺流程; 下游工艺过程决定于产品的性质和要求达到的纯度
如产品为菌体本身,则??艺比较简单,只需经过滤、得到菌体,再经干燥就可,如单细胞蛋白的生产。
如可以从发酵液直接提取,则可省去固液分离步骤。
如为胞外产物则可省去细胞破碎步骤。;2.如何着手对一种未知的发酵产品进行提取。
(1)产品的类型,性质的研究。
大致确定它是属于哪一类型;
了解它是一种成分还是几种成分的混合物。
(2)稳定性研究。
确定在哪一种条件下进行提取和精制不受破坏,即确定提取条件。;适合于大规模工业化生产的传统技术经过改造提高后,适应面更宽,效率会更高,仍然显示出强劲的生命力。
各种新型高效的过滤机械和离心机械的问世,结晶理论和离子交换技术的新进展,提高了产品的收率、质量和生产效率。;2. 新技术的研究开发;(3)其他新兴下游技术;第二节 发酵液的预处理;二、发酵液预处理的目的和要求
1.预处理的目的:
(1)改变发酵液的物理性质,促进悬浮液中分离固形物的速度,提高固液分离的效率
(2)尽可能使产物转入便于后处理的某一相中(多数是液体)
(3)去除发酵液中部分杂质,以利于后续各步操作。;2.发酵液预处理的要求:
(1)菌体的分离
(2)固体悬浮物的去除
(3)蛋白质的去除
(4)重金属离子的去除
(5)色素、热原质、毒性物质等有机杂质的去除
(6)改变发酵液的性质
(7)调节适宜pH值和温度
;三、预处理的方法;(一)加热法:
降低悬浮液的黏度,除去某些杂蛋白,降低悬浮物的最终体积,破坏凝胶状结构、增加滤饼的空隙度。(不适用热敏性的物质)
(二)调节悬浮液的pH
通过调节发酵液pH到蛋白质的等电点使蛋白质沉淀,同时络合重金属离子;
常用的酸化剂有草酸、盐酸、硫酸和磷酸;(三)发酵液的凝聚和絮凝;影响絮凝的因素;絮凝剂添加量对絮凝效果(滤速)的影响;发酵液pH对絮凝效果的影响;絮凝技术预处理发酵液的优点不仅在于过滤速度的提高,还在于能有效地去除杂蛋白质和固体杂质,如菌体、细胞和细胞碎片等,提高了滤液质量;(四)高价无机离子的去除方法
钙离子,可用草酸。
镁离子,可用三聚磷酸钠它和镁离子形成可溶性络合物,用磷酸盐处理,也能大大降低钙离子和镁离子的浓度。此法可用于环丝氨酸的提取。
铁离子,可加入黄血盐,使形成普鲁士蓝沉淀。;(五)杂蛋白质的去除方法
热变性
沉淀
大幅度改变pH
;四、发酵液的过滤;(一)影响过滤速度的因素;菌种对过滤速度影响;发酵条件对过滤速度影响;发酵周期对过滤的影响; (二)改善过滤性能的方法;助滤剂;助滤剂的加入有两种方法:
在滤布上预先铺一层助滤剂(1~2mm),该方法,会使滤速降低,但滤液透明度高
直接加入发酵液中。
助滤剂种类、用量要恰当,
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