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实验三兔抗SRBC免疫血清的鉴定;实验目的:掌握兔抗SRBC免疫血清鉴定的原理
熟悉鉴定方法的操作及结果判定
;实验原理:
若SRBC与其免疫血清相遇,出现肉眼可见的凝集块(凝集阳性),说明免疫血清中含有特异性抗SRBC抗体。
当SRBC在试管中与相应的抗体结合后,在补体的作用下,将导致SRBC裂解,发生免疫溶血。
反应体系中的SRBC和补体一定时,其溶血程度与免疫血清中抗体的效价呈正比,籍此可通过补体溶血试验测定抗体(溶血素)的效价。;实验材料:
免疫血清(实验二制备的抗血清)
——做1:100稀释
1%SRBC悬液
补体(豚鼠新鲜血清)——做1:30稀释
生理盐水
无菌试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、玻片;实验步骤:
1、玻片凝集试验-鉴定免疫血清中有无抗体
取一张玻片。在两边分别加生理盐水和免疫血清各一滴,然后各加一滴SRBC悬液,轻摇(或轻吹)玻片混匀,放置1-2min,若生理盐水侧均匀混浊,而免疫血清侧红细胞凝集成团,出现小颗粒,即为凝集试验阳性,说明免疫血清中有抗羊红细胞抗体。; 生理盐水+SRBC 抗血清+SRBC;第1管
生理盐水0.5ml
溶血素0.25ml(1:100)
;试管;试管;结果判定:
观察溶血现象,以呈现完全溶血的血清最高
稀释度为溶血素效价。
溶血现象:
完全溶血——清凉透明
不溶血——混浊不透明
试验结果:记录每个试管中的溶血情况;
写出溶血素的效价。
思考题:兔抗SRBC免疫血清的鉴定为什么采用玻片法?
;结果判定:
观察溶血现象,以呈现完全溶血的血清最高
稀释度为溶血素效价。
溶血现象:
完全溶血——清凉透明
不溶血——混浊不透明
试验结果:记录每个试管中的溶血情况;
写出溶血素的效价。
思考题:兔抗SRBC免疫血清的鉴定为什么采用玻片法?
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