(自创)基因工程的基本操作程序.pptx

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基因工程的基本操作程序;;一、目的基因的获取;一、目的基因的获取;提取某种生物的全部DNA;某种生物的单链mRNA;基因组DNA文库;PCR技术扩增与DNA复制的比较;模板DNA;;;;;;思考?;(三)人工合成;目的基因的mRNA;从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 利用化学方法人工合成; 科学家在培育抗虫棉时,经历了多次失败,才获得成功。 起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达。 然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导入棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力。 ;复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因;;为什么要构建基因表达载体呢? ;基因工程技术路线;(二)方法;(1)农杆菌转化法;③转化过程:; 基因枪法又称微弹轰击法,是利用压缩气体产生的动力,将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中,使目的基因与其整合并表达的方法。;(3)花粉通道法;胚珠;2.将目的基因导入动物细胞;(2)操作程序:;常用法:Ca2+处理;受体生物;四、目的基因的检测与鉴定;1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因;基因探针:是一段带有检测标记,且序列已知的,与目的基因互补的核酸序列。   基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。 ;DNA分子杂交示意图 ;(二)鉴定(个体生物学水平);;若不能表达,要对抗虫基因再进行修饰。;类型;提示: ①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA,然后高温解聚成单链,再与同位素标记的DNA探针杂交; ②抗原-抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫,产生相应的抗体,并提取出而来的。;9、要学生做的事,教职员躬亲共做;要学生学的知识,教职员躬亲共学;要学生守的规则,教职员躬亲共守。7月-217月-21Wednesday, July 21, 2021 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。21:00:4521:00:4521:007/21/2021 9:00:45 PM 11、??个好的教师,是一个懂得心理学和教育学的人。7月-2121:00:4521:00Jul-2121-Jul-21 12、要记住,你不仅是教课的教师,也是学生的教育者,生活的导师和道德的引路人。21:00:4521:00:4521:00Wednesday, July 21, 2021 13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇,谁就心想事成。7月-217月-2121:00:4521:00:45July 21, 2021 14、谁要是自己还没有发展培养和教育好,他就不能发展培养和教育别人。21 七月 20219:00:45 下午21:00:457月-21 15、一年之计,莫如树谷;十年之计,莫如树木;终身之计,莫如树人。七月 219:00 下午7月-2121:00July 21, 2021 16、提出一个问题往往比解决一个更重要。因为解决问题也许仅是一个数学上或实验上的技能而已,而提出新的问题,却需要有创造性的想像力,而且标志着科学的真正进步。2021/7/21 21:00:4521:00:4521 July 2021 17、儿童是中心,教育的措施便围绕他们而组织起来。9:00:45 下午9:00 下午21:00:457月-21

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