选11DNA重组技术的基本工具.pptxVIP

设想一; 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取，产量低成本高。 而微生物生长迅速，容易控制。于是科学家设想，若能将人的胰岛素基因导入微生物体内，并得以表达，就不仅能解决产量问题，还能大大降低生产成本，使药品价格大幅下降。; 这些定向改造基因 的设想能实现吗？;专题1 基因工程;别名;;1DNA重组技术的基本工具;;;;;;;;;;分子缝合针：DNA连接酶;练习;; T;; 作用部位：;;;;;;;;;议一议; RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点，并与 其结合。;;不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;课本知识回顾;DNA 重组技术的基本工具;限制性核酸内切酶;DNA连接酶;基因进入受体细胞的载体;特异性地识别和切割DNA（1分）;59．若将上图所示X－1、X－2、X－3、X－4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿。;（2011上海卷）回答下列有关基因工程的问题。;（2011上海卷）回答下列有关基因工程的问题。;（1）一个图甲所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。;（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。;（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是 ____________________________________。;（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。; 【解析】质粒和目的基因连接后获得重组质粒，该过程需要连接酶作用，故混合后加入DNA连接酶。; 【解析】质粒上的抗性基因为标记基因，用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞。; 【解析】将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作为唯一碳源的培养基进行培养受体细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的因不能获得碳源而死亡，从而达到筛选目的。;天津卷7.（26分） Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。 据图回答： （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。 （2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号）。 A.启动子 B. tetR C.复制原点 D. ampR （3）过程①可采用的操作方法是 （填字母代号）。 A.农杆菌转化 B. 大肠杆菌转化 C.显微注射 D. 细胞融合 （4）过程②可采用的生物技术是 。 （5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。[来源:Z*xx*k.Com] （6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术。 A.核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C.抗原—抗体杂交 D. PCR 答案（26分） Ⅰ.（14分）[来源:学,科,网] HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素 A C 胚胎移植技术 全能 C 思路分析：I（1）据图，仅将人乳铁蛋白基因切割出来，需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BanHI切割，右侧用HindIII切割。当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，TETR基因被人乳铁蛋白基因隔开，不是完整的，而anpR基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠肝菌首先需要字含氨苄青霉素的培养基上进行。 （2）基因表达的调控序列在启动子上。 （3）将重组质粒导入动物细胞，常采用显微镜的方法。 （4）过程②的左侧是早期胚胎，右侧是代孕牛，过程②采用的生物技术是胚胎移植。 （5）将细胞培养为个体，利用了细胞的全能性。 （6）检测目的