培养基灭菌与空气净化培训教材.pptx

培养基灭菌与空气净化 ;第一节 培养基灭菌 一、灭菌的原理和方法 ; 用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物。一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。 例如，巴氏消毒法，是将物料加热至60℃维持30min，以杀死不耐高温的微生物营养细胞。 ; 用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物，包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。灭菌条件：121℃，20-30min。 ＊消毒不一定能达到灭菌要求，而灭菌则可达到消毒的目的。 ; 关于灭菌和消毒的不正确的理解是（ ） A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细 胞、芽孢和孢子 B．消毒和灭菌实质上是相同的 C．接种环用灼烧法灭菌 D．常用灭菌的方法有加热法、过滤法、紫外 线法、化学药品法;防腐（antisepsis）;除菌的方法 ;1.化学试剂灭菌法 ;谷氨酸棒状杆菌的培养液常采用的灭菌方法是（ ） A．高压蒸汽灭菌 B．高温灭菌 C．加入抗生素灭菌 D．酒精灭菌; 培养基的湿热灭菌 ; 将配制好的培养基同时放在发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程，也称实罐灭菌。;;发酵罐;连续灭菌的流程与设备;（3）维持罐，使料液在灭菌温度下保持10min。因为：连消塔加热的时间很短，光靠这段时间的灭菌是不够的； （4）冷却管，使料液冷却到40?50°C后（冷水喷淋） ，输送到预先灭菌过的罐内。 ;连续灭菌过程中温度的变化(虚线) ;;空气净化（除菌） 发酵对空气无菌程度的要求 一般要求1000次使用周期中只允许有一个菌通过，即经过滤后空气的无菌程度为N=10-3。;空气除菌;空气过滤除菌的原理与介质 过滤除菌的种类 绝对过滤：过滤介质的滤孔小于细胞和孢子。 如聚乙烯醇缩甲醛树脂（PVF）制成的 0.3 ?m的微孔滤膜。 深层介质过滤：介质的孔隙一般大于微生物细胞。 如用棉花、玻璃纤维和颗粒活性炭填充的过滤器。;深层介质过滤的原理 1、惯性冲击作用： 2、拦截滞留作用： 3、布朗扩散：＜1um 慢气流 不规则 直线运动 4、重力沉降：重力 气流拖带力 5、静电引力作用;深层介质过滤???原理 微粒随气流通过滤层时，由于滤层纤维的层层阻碍，使气流出现无数次改变运动速度和方向的绕流运动，引起微粒与滤层纤维间产生惯性冲击、拦截、布朗扩散、重力沉降、静电引力等作用把微粒滞留在纤维表面上，实现过滤的目的。 ;空气过滤除菌介质;发酵生产中制备无菌空气的大致过程 ;空气过滤除菌流程 ;; 空气压缩 克服输送过程中过滤介质的阻力并维持一定的气流速度。 ;空气贮罐 紧接空压机安装 消除压缩机排出空气量的脉冲，维持稳定的空气压力。 利用重力沉降作用除去部分油雾。 ; 压缩空气的冷却 压缩后空气温度显著上升，能引起过滤介质的炭化或燃烧，增大发酵罐的降温负荷，增加培养液水分的蒸发，需冷却。; 压缩空气的除油除水 冷却降温后的空气湿度增大，会使过滤介质受潮失效。 ;旋风分离器; 采用惯性拦截等机理，有效去除空气中的水、油雾、尘埃，不锈钢丝网可清洗，使用寿命长。; 空气的加热 将除油水的空气加热（温差在10～15°C 左右），降低相对湿度（达50%～60%）后，输入过滤器。;发酵生产中制备无菌空气的大致过程 ;为什么要进行空气的预处理？ 提高压缩前空气的洁净度 去除压缩后空气中的油和水;空气过滤器 过滤除菌的关键设备;;;发酵车间的空气过滤器;空气净化的流程;180M3发酵罐车间;发酵设备——发酵罐;发酵罐的类型;鼓泡式反应器 气升式反应器;;;;;;发 酵 控 制 Fermentation control;实验一 产酶菌株的筛选;定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。 采样：有针对性地采集样品。 增殖：人为地通过控制养分或培条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。 分离：利用分离技术得到纯种。 发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。; （一）采样;;2、采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。 3、采土方式：在选好适当地点后，用小萨子除去表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点