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精品文档 实验一、骨髓瘤细胞的培养 骨髓瘤细胞系应和免疫动物属于同一品系， 这样杂交融合率高， 也便于接种杂交瘤细胞 在同一品系小鼠腹腔内产生大量 McAb。 常用骨髓瘤细胞系有： NS1、 SP2／0、 X63 Ag8.653 等。 骨髓瘤细胞的培养适合于一般的培养液，如 RPMI1640， DMEM培养基。小牛血清的浓度 一般在 10～ 20％，细胞的最大密度不得超 106／ ml，一般扩大培养以 1∶ 2 稀释传代， 每 2～ 3 天传代一次。细胞的倍增时间为 16～ 20 小时，上述三株骨髓瘤细胞系均为悬浮或轻微贴 壁生长，只用弯头滴管轻轻吹打即可悬起细胞。 二 材料： 1. 试剂： （ 1）培养基 杂交瘤技术中使用的细胞培养基主要有 RPMI-1640 或 DMEM（ Dulberco Modified Eagles Medium）两种基础培养基，具体配置方法按厂家规定的程序，配好后过滤 除菌（ 0.22um 滤膜），分装， 4℃保存。 不完全 RPMI-1640 培养基： RPMI-1640 培养基原液 96ml,100 × L.G. 溶液 1ml ，双抗溶液 1ml， 7.5% NaHCO3溶液 1-2ml ， HEPES溶液 1ml。 不完全 DMEM培养基： DMEM 13.37g,超纯水或四蒸水 980ml， NaHCO33.7g ， 100×