2021年微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测.doc

2021年微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测 2021年微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测 PAGE / NUMPAGES 2021年微生物实验报告水中细菌总数和大肠菌群的检测 试验六 水中细菌总数和大肠菌群检测 摘 要: 本试验以测定公园河流水细菌总数和大肠菌群数量, 来测定特定地点水质情况。初步介绍了一个通用方法来检测水源健康指标, 判定水体质量。对该试验点水源作出了定性评价, 以及相关试验中怎样提升梯度反复精度分析。 关键字: 河流水; 细菌总数测定; 大肠菌群; EMB培养 序言 多种天然水中常含有一定数量微生物。水中细菌总数往往同水体受有机污染程度呈正相关, 所以是评价水质污染程度关键指标之一。细菌总数是指1mL水样中所含细菌菌落总数[cfu/g(mL)], 可用稀释平板计数法检测。水中大肠菌群数量可用来判定水源是否被粪便污染, 并可间接推测水源受肠道病原菌污染可能。 特征: G-无芽孢杆菌, 兼性厌氧、 在37℃24h 多管发酵法 初发酵: 合适稀释样品, 乳糖发酵培养, 产酸产气; 分离培养: 伊红美蓝（EMB）平板上划线分离, 出现紫色、 粉红色特征性菌落; 复发酵验证: 挑取特征性菌落进行乳酸复发酵验证。 材料和方法 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基: 用于水中细菌总数测定 牛肉膏5g, 蛋白胨10g, NaCl 5.0 g, 琼脂8g, 蒸馏水1000ml; pH 7.0 乳糖胆盐蛋白胨培养基: 用于初发酵 1×: 蛋白胨 20g、 牛胆盐 5g、 乳糖 10g、 0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL（调pH值后加）、 水 1000mL、 pH 7.2－7.4 三倍浓缩液（3×）: 除水以外, 其它成份取三倍用量 分装: 1×培养基分装9ml/管, 3×培养基分装5ml/管或50ml/瓶, 均装上德汉氏小管。 灭菌条件: 115℃ EMB培养基: 用于大肠菌群菌落判定 脱水培养基, 按说明书操作, 水用量为90%。 水源: 紫竹院河水 仪器: 高压灭菌锅、 无菌培养皿、 试管、 吸管、 接种环 、 德汉氏小管、 温箱、 载玻片、 酒精灯、 显微镜等。 试剂 : 牛肉膏, 蛋白胨, NaCl, 琼脂粉, 伊红美兰琼脂培养基、 水、 乳糖、 0.04%溴甲酚紫水溶液、 胆盐、 革蓝氏染色试剂 具体试验步骤: 1）, 相关器械灭菌操作, 以及前往紫竹院取少许样品水。 2）, 根据上述配料, 无菌操作配置培养基。 3）, 细菌总数测定: 取上述样品水, 一次稀释10-1,10-2,10-3,3个浓度。对于每个浓度, 取1ml稀释液加入冷却好牛肉膏蛋白胨培养基中, 立刻混匀, 每个浓度反复一次。将平皿倒置培养在37℃ 4）, 大肠菌群测定: 将样品水稀释成100,10-1,10-2,3个梯度。 试验结果与数据分析 1, 细菌菌落总数 组别 稀释浓度及菌落数 平板菌落情况 汇报方法选择 菌落总数（cfug , cfu/ml 10-1 10-2 10-3 1 12 0 0 均小于30 最低稀释度下菌落数 × 稀释倍数 8.0×10 2 4 0 0 平均 8 0 0 2,大肠菌群总数 试验结果 原溶液 10-1 10-2 ck 初发酵 产酸 + + + + + - 产气 + + + + + - EMB 紫黑色 + + + + + - 粉红色 - 革兰氏染色 G- + + + + + - - 结论 + + + + + 0 阳性管数 5 0 0 3, EMB 数据值计算 查表可得, MPN= 接种量最大管: 1ml 每100ml水样中菌数最大可能值: 230 95%可信限值 上限: 700 下限: 70 水样分析得出这么结果: 细菌总数: 80个/mL 大肠菌群数: 2300个/L 大肠菌群数占细菌总数: 2.88%。 依据中国《生活饮用水卫生标准》GB5749-85要求 细菌总数不超出100个, 已达标。 大肠菌群不得超出1000个, 超标。 经过严格消毒处理, 大肠杆菌不超出10000个, 水样达标。 结论: 从上述水样分析, 我们能够得出此处河流水污染不是很严重, 作为景观水, 已经达成了标准, 不过这类水是不能作为饮用水, 可能存在部分粪便污染, 造成大肠菌群数量过高, 倘若经过严格消毒灭菌, 才能饮用。 试验讨论: 1, 大肠菌群定义是什么？、 为何要选择大肠菌群作为水源被肠道病原菌污染指示菌？ 大肠菌群并非细菌学分类命名, 而是卫生细菌领域用语, 它不代表某一个或某一属细菌, 而指是含有一些特征一组与粪便污染相关细菌, 这些细菌在生化及 \o 血清学 血清