植物组织培养课件 第二章 实验室设备和基本操作技术.pptVIP

第二章 实验室设备和基本操作技术 ;第二章 实验室设备和基本操作技术 ;一、植物组织培养实验室布局;一、植物组织培养实验室布局;一、植物组织培养实验室布局;一、植物组织培养实验室布局;44㎡;84 ㎡;;; 准备室;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备;二、实验室需要基本仪器设备; 三、培养基及其配制 ;(一)培养基的种类;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;(二) 培养基成分;;(二) 培养基成分;（三） 培养基的制备;（三） 培养基的制备;（三） 培养基的制备;（三） 培养基的制备;（三） 培养基的制备;（三） 培养基的制备; 以上配好的母液需贮存于2-4℃的冰箱中，定期检查有无沉淀或微生物的污染，如发现霉菌、浑浊或沉淀，则不能再用。 ;配制母液时应注意的事项;（三） 培养基的制备;-1N NaOH或HCl调节pH）。（一般高压灭菌后 pH值会下降0.2） ; 配置好的培养基应尽快使用，常温下（25℃）一般放置1-2周，4℃黑暗下保存也不宜时间过长。 原因：① 污染 ② 成分变化 如IAA易分解 ; 高温高压消毒时应注意： ;kg/cm2时，打开放气阀排净冷空气（1-2kg/cm2，温度121℃下 维持15 ~ 20 min（18 min） 。 也可通过直接打开放气阀加热排除锅内冷空气。;灭菌法 ;五、外植体处理; 一些表面消毒剂的消毒效果 消毒剂 使用浓度 消毒时间（min） 效果? 次氯酸钙 9-10% 5-30 很好 次氯酸钠 2% 5-30 很好 过氧化氢 10-12% 5-15 好 溴水 1-2% 2-10 很好 硝酸银 1% 5-30 好 氯化汞 0.1-1% 2-10 满意 抗生素 4-50mg/L 30-60 相当好 ; 在用杀菌剂处理之前先把植物材料在70%酒精（70%酒精比其它浓度酒精更具渗透力和杀菌力，且易散发，但灭菌时间不易过长，否则会杀死组织细胞。）中浸数秒，或在消毒液里加上几滴表面活性剂，如Triton-X或Tween-80。灭菌处理时可磁力搅拌或人工多次搅动），提高杀菌效果。 表面消毒处理之后，必须用无菌水将材料漂洗3-4次，以除掉所有残留的杀菌剂。 ; 3. 无菌操作 ; 无菌操作前10min先使超净工作台处于工作状态，让过滤空气吹拂工作台和四周台壁。所有的操作工具包括培养皿、解剖刀、接种针、镊子和剪刀等事先均需用牛皮纸包好进行湿热灭菌。 ;注意事项： ;（5）打开培养容器塞子或盖子前，火焰烧瓶口，把灰尘固定在瓶口上，杀死菌类。因为试管在贮存时可能积聚了少量灰尘，在室温冷却时管口形成负压，当塞子拔开时，空气进入而带入灰尘。 ;（8）身体不宜进入超净台，以防头皮屑等落入培养基。 ;;培养基污染有几个可能的来源： ;六、培养条件;六、培养条件;七、继代培养;;七、继代培养;七、继代培养;八、驯化移栽;The end;一个用来存放天平 天平精确度 1/10g——蔗糖、琼脂 1/100g——大量元素 1/10000g——微量元素、植物激素、有机物 一个用来配制试剂和培养基 ; 某些生长调节物质（如GA3、玉米素、ABA）、某些维生素等，遇热易分