紫外分光光度计测蛋白质含量.docVIP

可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 紫外分光光度法测定蛋白质含量 1 仪器与试剂 TU-1901紫外-可见分光光度计，比色管，吸量管 标准蛋白质溶液：5.00 mg.mL-1溶液 0.9% NaCl溶液，待测蛋白质溶液 2 实验方法与原理 本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量。紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm～750nm波长范围内的吸收光谱，是以溶液中物质分子对光的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。紫外-可见吸收光谱的产生是由于分子的外层价电子跃迁的结果，其吸收光谱为分子光谱，是带光谱。 蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280nm附近（不同的蛋白质吸收波长略有差别）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度的关系服从朗伯-比耳定律。该测定法具有简单灵敏快速高选择性，且稳定性好，干扰易消除不消耗样品，低浓度的盐类不干扰测定等优点。 3 实验步骤 3.1 准备工作 3.3.1启动计算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器。 3.3.2 在工作界面上选择测量项目（光谱扫描，光度测量），本实验选择光度测量，设置测量条件（测量波长等）。 3.3.3 将空白