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可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 可修改 欢迎下载 精品 Word 用2-△△Ct法分析real-time PCR数据 -----联合应用LightCycler Data Analysis软件和MS Excel By netmee， netmee@163.com 引用请注明作者。 1、打开存取的数据文件，点击 2、依次点击，，这是适合SYBR green为染料的选项。点击step1：Baseline下的“change graph settings”小图标。取消弹出的Customize Graph选项卡中的Logarithmis选项，点击“OK”按钮，退出选项卡。 3、点击下的“change graph settings”小图标，取消弹出的Customize Graph选项卡中的Logarithmis选项，点击“OK”按钮，退出选项卡。 4、在选项卡中拖动红色标记线，选取个条曲线都为直线上升部位。 5、可以在选项卡中观察是否需选取的是曲线直线上升部分。观察绿线部分与S型曲线交叉的部分是否为直线。 6、如果确为直线，则左侧的“Crossing Point”值为所需要的Ct值。  7、依次选取下图菜单：将数据导出为文本文件。 8、打开所保存的文本文件，如图选取 9、将数据粘贴入新建的excel文件，“Crossing Point”列即是Ct值，删除“Standard”和“Calculated Concentration”列。 10、将目的基因，本例中为“iNOS”的Ct值按标本对应剪切入beta-actin值右侧一列。分别标记两列数据为“beta-actin”和“iNOS”。 11、设置所有Ct值的单元格格式 12、数字选项卡，分类选择为数值，点击确定。 13、将E列（目的基因Ct值右侧一列）输入公式“=D4-C4”，求出目的基因与同管beta-actin Ct值之差，即△Ct。 14、向下拉复制公式，将△Ct列数值计算出。 15、在△Ct 列右侧一列插入公式“=POWER(2,(0-E4))”，此即目的基因相对beta-actin的相对表达量，即2-△Ct（2的-△Ct次方）。 16、在2-△Ct列右侧插入公式“=F4/$F$4”，此列即“2-△△Ct”列，复制公式填满所有标本对应的2-△△Ct空格。 17、至此，2-△△Ct法计算的各标本目的基因的相对表达量完成，2-△△Ct列的数据可以用统计软件进行分析。 亲爱的用户 亲爱的用户： 烟雨江南，画屏如展。在那桃花盛开的地方，在这醉人芬芳的季节，愿你生活像春天一样阳光，心情像桃花一样美丽，感谢你的阅读。 1、最困难的事就是认识自己。 TIME \@ yy.M.d 21.3.27 DATE \@ M.d.yyyy 3.27.2021 DATE \@ HH:mm 10:21 DATE \@ HH:mm:ss 10:21:44 DATE \@ MMM-yy Mar-21 DATE \@ HH:mm 10:21 2、自知之明是最难得的知识。 TIME \@ EEEE年O月A日 二〇二一年三月二十七日 TIME \@ yyyy年M月d日星期W 2021年3月27日星期六 3、越是无能的人，越喜欢挑剔别人。 DATE \@ HH:mm 10:21 DATE \@ M.d.yyyy 3.27.2021 DATE \@ HH:mm 10:21 DATE \@ M.d.yyyy 3.27.2021 DATE \@ HH:mm 10:21 DATE \@ HH:mm:ss 10:21:44 DATE \@ M.d.yyyy 3.27.2021 DATE \@ HH:mm 10:21 DATE \@ M.d.yyyy 3.27.2021 4、与肝胆人共事，无字句处读书。 DATE \@ M.d.yyyy 3.27.2021 DATE \@ M.d.yyyy 3.27.2021 DATE \@ HH:mm 10:21 DATE \@ HH:mm 10:21 DATE \@ HH:mm:ss 10:21:44 DATE \@ HH:mm:ss 10:21:44 5、三军可夺帅也。 DATE \@ dddd, MMMM d, yyyy Saturday, March 27, 2021 DATE \@ MMMM yy March 21 DATE \@ dddd, MMMM d, yyyy Saturday, March 27, 2021 DATE \@ M/d/yyyy 3/27/2021 6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。 TIME \@ h时m分 10时21分 TIME \@ h时m分 10时21分 DATE \@ d-MM