12小麦成熟胚愈伤组织诱导.pptxVIP

实验十二 小麦成熟胚愈伤组织诱导;实验目的;植物组织培养;植物细胞全能性： 任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。;外植体：从植物体上分离下来的用于离体培养的那部分材料。 愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则薄壁细胞，多在植物体切面上产生。 脱分化：已分化好的组织细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。或者说是由高度分化的植物组织或器官产生愈伤组织的过程。 再分化：脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。或者说是由愈伤组织再生出小植株的过程。 ;;应用领域;愈伤组织;利用外植体能培养出完整植株　　;;;蝴蝶兰;虎头兰;红豆杉;植物组织培养特点;培养基;MS培养基的组成;激素配比模式;培养基母液配制;培养基的制备——母液的配制和保存;MS培养基母液的配制;配制母液时的注意事项;培养基的配制、消毒与分装;;;;实验材料与药品;实验方法;正式接种前30min，打开超净工作台上的紫外灯和风机，30min后接种； 上超净台的第一件事是关闭紫外灯并打开照明灯； 把解剖刀、镊子、解剖针等器械浸泡在75％酒精中； 点燃酒精灯； 用75％的酒精棉球擦拭双手； 外植体的消毒：把麦粒置于70 %乙醇中浸泡5min，之后在2.5%NaClO中消毒15min，然后用无菌水冲洗3次。 ;超净台上操作 （１）用酒精棉球擦手，然后点燃废酒精棉球擦拭超净台工作台面。取出一张无菌滤纸，放在面前。 （２）用酒精灯火焰烧灼刀柄、刀片、镊子等，自然冷却后置于无菌滤纸上。 （３）取一瓶培养基，除去橡皮筋，揭开封口膜，把培养基放在紧靠酒精灯火焰无菌区的后方。 （４）用酒精棉球擦手，尤其是左手拿麦粒的二个手指和指甲边缘。 （５）剥离成熟胚并接种，盾片一面向上。注意无菌操作，均匀接种10个即可。 （６）盖好封口膜，缠好皮筋，用记号笔在培养瓶封口膜上写好班级姓名。 放入培养箱，25℃培养7-10天后观察记???。;小麦种子;培养基消毒、外植体消毒、超净台消毒和操作者无菌操作是否符合规范，是防止菌类污染的关键； 每剥离接种完一个胚，接种工具均要在点燃的酒精灯上进行烧灼消毒。 每一步操作都不要远离酒精灯火焰无菌区。 注意防火（盛有酒精用于浸泡接种工具的器皿要远离酒精灯）。 接种结束后，清理和关闭超净工作台。;实验作业;愈伤组织;再分化出苗