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微生物实验总结报告模板
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淀粉与微生物篇一:实验十分别产淀粉酶的微生物
第十次实验分别产淀粉酶微生物
学院:生命科学学院
专业:生物科学类
年级:20XX级
姓名:
学号:1007040085
20XX年XX月XX日
实验十分别产淀粉酶的微生物
一、实验目的
1、熟习常用微生物培育基(牛肉膏蛋白胨培育基)的配制方法。
2、学习各样无菌操作技术,并用此技术进行为微生物稀释分别、划线分别接种。
3、用平板划线法和稀释涂布平板发分别微生物。
4、认识为微生物存在的广泛性,领会无菌操作的重要性。
5、掌握分别产淀粉酶微生物的试验方法和步骤,认识产淀粉酶的微生物种类及形态。
二、实验原理
土壤是微生物生活的大本营,是找寻和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。不一样土样中各种微生物数目不一样,一般土壤中细菌数目最多,其次为放线菌和霉菌。一般在较干燥,偏碱性、有机质丰富的土壤中放线苗数目许多;酵母菌在一般土壤中的数目较少,而在水果表皮、葡萄园、果园土中数目多些。本次实验从土壤中分别产淀粉酶的微生物,应当取那些富含产淀粉酶的微生物的土样。从复杂的微生物集体中获取只含有一种或某一种类微生物的过程称为微生物的分别与纯化。常用的方法有
1、简单单细胞挑取法
2、平板分别法和稀释涂布平板法
此次实验采纳的是平板分别法和稀释涂布平板法联合,该方法操作简单,广泛用于微生物的分别与纯化。其原理包含:
1)稀释后的细胞悬液图不在平板上能够分别得单个菌株
2)在合适于待分别微生物的生长条件(如营养、酸碱度、温度与氧等)下培育微生物,或加入某种克制剂造成只利于待分别微生物的生长,而克制其余微生物生长的环境,进而裁减一些不需要的微生物。
3)微生物在固体培育基上生长形成的单个菌落能够是由一个细胞生殖而成的会合体。所以可经过挑取单菌落而获取纯培育。获取单菌落的方法可经过稀释涂布平板或平板划线等方法达成。
以淀粉作为唯一碳源的培育基培育未分别细菌,能产淀粉酶的细菌能生长,且菌落四周出现透明圈(淀粉不透明,被消化后变透明),则产淀粉酶微生物被分别出来。本实验采纳透明圈查验法检测培育物中能否有产淀粉酶微生物的生长。
三、实验仪器及试剂
1、器械:
培育皿、载玻片、盖玻片、一般光学显微镜、量筒、滴管、吸水纸、烧杯、三角瓶、酒精灯、玻璃棒、接种环、镊子、恒温培育箱、高压蒸汽灭菌锅、、天平、滤纸、pH试纸等。
2、试剂:
配制牛肉膏蛋白胨培育基的原料(牛肉膏、NaCl、琼脂、蛋白胨)、淀粉、卢戈氏碘液、蒸馏水、250ml三角瓶中装90ml无菌水加20粒玻璃珠,作稀释用等。
3、土样:
取自贵州大学农生楼后土壤10g,地下10cm左右。
四、实验步骤:
1、配制牛肉膏蛋白胨培育基:
1)配制牛肉膏蛋白胨琼脂培育基400ml(用于11个平皿和7支试管斜面)牛肉膏0.5%…………………………………2g
蛋白胨1%……………………………………4g
NaCl0.5%…………………………………..2g
琼脂2%……………………………………..8g
淀粉0.5%........................................2g
pH……………………………………7.0~7.2
(2)无菌水的制备
分别取9ml蒸馏水加入5支试管中,加塞后用报纸包扎捆绑,放入高压蒸汽灭菌锅灭菌备用。取90ml蒸馏水加入250ml三角瓶中,相同的操作,灭菌备用。
(3)器皿的准备
将刻度吸管用报纸包扎,培育皿装入专用灭菌杯分别放入高温灭菌箱灭菌备用。
2)倒11个平板和7支试管斜面,包扎,0.1Mp、1℃、灭菌30min.
2、制备土壤稀释液:
称取土样10g,放入盛有250ml无菌水的带有玻璃珠的三角瓶中,振荡摇匀10min使土和水充足混淆,而后用移液枪从三角瓶中汲取1ml(此操作要求无菌操作),加入另一盛有9ml无菌水的试管中,混淆平均,以此类推分别制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不一样稀释度的土壤溶液。
3、涂布培育:
0.00001、0.000001浓度的土壤稀释液作为涂布平板培育的对象,将其分别涂布在3个牛肉膏蛋白胨培育基中,共6个培育基,标号,37°C温箱培育48h。
4、选用目的菌株:
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