一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112618708 A (43)申请公布日 2021.04.09 (21)申请号 202011375244.X (22)申请日 2020.11.22 (71)申请人 翁炳焕 地址 317300 浙江省仙居县安州街道圭峰 路660号仙居县安州医院 (72)发明人 翁炳焕　 (51)Int.Cl. A61K 39/215 (2006.01) A61P 31/14 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) C12N 15/66 (2006.01) C12N 15/57 (2006.01) C12N 15/113 (2010.01) C12N 15/50 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) 权利要求书2页 说明书20页 附图2页 (54)发明名称 一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠 疫苗 (57)摘要 一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠 疫苗，其特征在于，以hACE2基因敲除的RNA干扰 干细胞取代传统新型冠状病毒疫苗的腺病毒载 体。所述RNA干扰干细胞，为一种在敲除新冠病毒 易感基因ACE2、转染永生化基因SV40LT和/或 hTERT的基础上重组新冠病毒M、N、E和/或S基因 的靶向干扰基因shRNA的干细胞。这种RNA干扰干 细胞具有抵抗新冠病毒感染、无限传代、抑制新 冠病毒在干细胞内复制的功能，可按姓名、ABO血 型或HLA分型长期预存于‑196℃干细胞库备用， 不但可取同型干细胞个体化治疗COVID‑19，还可 A 取代具有免疫源性的腺病毒载体，将新冠病毒抗 8 体产生基因S1‑RBD插入RNA干扰干细胞DNA中，制 0 7 8 备能产生新冠病毒中和抗体的RNA干扰干细胞载 1 6 2 体疫苗。 1 1 N C CN 112618708 A 权　利　要　求　书 1/2 页 1.一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗，其特征在于，以hACE2基因敲除的 RNA干扰干细胞取代传统新冠病毒疫苗的腺病毒载体制备个体化治疗COVID‑19疫苗。 2.根据权利要求1所述的一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗，其特征在于， 所述RNA干扰干细胞，包括敲除新冠病毒易感基因hACE2的干细胞和/或永生化干细胞、敲入 新冠病毒M、N、E和/或S基因的靶向干扰基因shRNA的干细胞和/或永生化干细胞；所述RNA干 扰干细胞载体疫苗指将新冠病毒抗体产生基因敲入RNA干扰干细胞DNA。 3.根据权利要求1、2所述的一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗，其特征在 于，所述RNA干扰干细胞载体疫苗，包括在同一干细胞中同时敲除新冠病毒易感基因hACE2、 敲入新冠病毒M、N、E和/或S基因的靶向干扰基因shRNA和新冠病毒抗体产生基因S1‑RBD的 干细胞和/或永生化干细胞。 4.根据权利要求1、2或3任一所述的一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗，其 特征在于，所述干细胞包括胚胎干细胞、成体干细胞、间充质干细胞、肺干细胞、诱导的干细 胞或肺干细胞；所述永生化干细胞包括以SV40LT和/或hTERT基因转染的干细胞。 5.根据权利要求1所述的一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗，其特征在于， 所述RNA干扰干细胞包括重组慢病毒载体的构建、重组慢病毒载体和包装质粒共转染293FT 细胞进行慢病毒的包装、慢病毒转染、RNA干扰干细胞的筛选和鉴定。 6.根据权利要求1所述的一种hACE2敲除的RNA干扰干细胞载体新冠疫苗