一种使用双重实时荧光等温扩增技术检测核酸的方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 111394431 A (43)申请公布日 2020.07.10 (21)申请号 202010454780.2 (22)申请日 2020.05.26 (71)申请人 尹秀山 地址 110041 辽宁省沈阳市大东区东北大 马路104号 (72)发明人 尹秀山　于琳　 (51)Int.Cl. C12Q 1/6844(2018.01) C12Q 1/70(2006.01) C12R 1/93(2006.01) 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图3页 (54)发明名称 一种使用双重实时荧光等温扩增技术检测 核酸的方法 (57)摘要 本发明属于病毒检测技术领域，公开了一种 使用双重实时荧光等温扩增技术检测核酸的方 法。本发明采用双通路双荧光通道等温平台同时 检测新型冠状病毒SARS-CoV-2和甲型H1N1流感 病毒RNA的存在。本发明优点是多重性，可以在一 个反应体系中检测出两种病毒，检测时间周期 短，适用于临床的快速检测诊断，检测病毒特异 性高，准确率高；检测灵敏度高，实验结果重复性 好，精密度高；检测引物具有特异性，大大提高了 检测效率，节约了扩增体系中各试剂的使用量， 降低检测成本。 A 1 3 4 4 9 3 1 1 1 N C CN 111394431 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种使用双重实时荧光等温扩增技术检测核酸的方法，其特征在于；本发明采用双 通路双荧光通道等温平台同时检测新型冠状病毒SARS-CoV-2和甲型H1N1流感病毒RNA的存 在，包括可特异性扩增新冠病毒SARS-CoV-2 ORF1ab基因的引物和探针序列和甲型H1N1流 感病毒HA基因的引物和探针序列。 2.根据权利要求1所述的检测方法中包含新冠病毒SARS-CoV-2 ORF1ab基因的引物和 探针序列如下，引物序列： S-F3: 5-CCACTAGAGGAGCTACTGTA-3, S-B3: 5-TGACAAGCTACAACACGT-3, S-FIP: 5-AGGTGAGGGTTTTCTACATCACTATATTGGAACAAGCAAATTCTATGG-3, S-BIP: 5-ATGGGTTGGGATTATCCTAAATGTGTGCGAGCAAGAACAAGTG-3, S-LF: 5-CAGTTTTTAACATGTTGTGCCAACC-3, S-LB: 5-GAGCCATGCCTAACATGCTTAG-3, 探针序列： S-Q-FIP: 5-AGGTGAGGGTTTTCTACATCACTATATTGGAACAAGCAAATTCTATGG-3, S-Fd：5-ATAGTGATGTAGAAAACCCTCACCT-3， 针对甲型H1N1流感病毒HA基因片段合成的引物序列： H-F3: 5-GCTAAGAGAGCAATTGAGC-3， H-B3: 5-ATGTAGGATTTGCTGAGCT-3， H-FIP: 5-CGAGTCATGATTGGGCCATGACAGTGTCATCATTTGAAAGGTTT-3， H-BIP: 5-AAGGTGTAACGGCAGCATGTCCGAATTTCCTTTTTTAACTAGCCAT-3， H-LF: 5-ACTTGTCTTGGGGAATATCTC-3，