病毒学检验重点.pdfVIP

病毒的特点 ： 1、形体微小，能通过细菌滤器，用电子显微镜才能观察到。 2、无细胞结构，其主要成分是核酸和蛋白质 3、每种病毒只含有一种类型的核酸（ RNA 或 DNA ） 4、因缺乏完整的酶系统和能源，故只能寄生于活细胞内，依靠宿主细胞的代谢系统合 成蛋白质和核酸 5、病毒以其基因为模板，在宿主细胞内复制出新的病毒颗粒 6、为了在生物界保存其种属，病毒具备从一个宿主转移到另一个宿主的能力，并具有 对敏感宿主的侵染性和复制性 7、在宿主体外，能以大分子状态存在，并可长期保持其侵染能力 8、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的基因组中，并能诱发潜伏感染 体外细胞培养的基本条件 ： 1、条件要求高，培养液组分复杂，需要添加血清才能满足生长需要 2 、避免微生物污染，需要在培养液中加入抗生素。 3 、体外细胞培养的基本要求主要包括细胞接种（尽量选择对数期细胞接种） 、 4 、培养液营养成分、 5 、酸碱度（能耐受的 ph 范围为，依靠缓冲系统调节） 、 6 、气体条件（细胞生长需要 CO2 ，大规模培养需要有足够的氧气） 、 。 7 、温度（最适温度为 35-37 C ）、 8 、水的纯度（一般要求去离子水或三蒸水） 、 9 、无菌条件等 实验动物的微生物控制分类： 1、 普通动物，一级动物，要求不携带动物烈性传染病和人兽共患病病原 2、 清洁动物，二级动物，在一级动物要求上，不携带对动物危害大、对实验干扰大的 病原体，外观健康，主要器官不得有组织病理学病变 3、 无特定病原体动物，三级动物，除普通动物、清洁动物不得携带病原体外，还要求 排除潜在感染或条件致病菌的感染 4、 无菌动物，四级动物，要求在体内外不得检出其它生命体 实验动物的遗传学分类 1、 近交系，指经过连续 20 代以上全同胞或亲子交配培育的动物品系 2、 封闭系，不从外界引入新的血缘，非近亲交配方式的实验动物群体 3、 突变系，由于遗传基因发生突变而具有某些特殊形状的动物 4、 杂交群动物，由不同品系杂交所产生的后代 5、 转基因动物，插入外源基因后能正常繁殖的动物 大鼠、小鼠的采血方法 1、 剪尾采血，动物麻醉后，将尾端剪去约 5mm ，待血液流出采集，小鼠可每次采血， 大鼠约 2、 眼眶后静脉丛采血，拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤固定，轻轻压迫颈部两侧， 使眼球充分外凸。采血管插入眼角与眼球之间，向眼底方向刺入，切开静脉丛，血 流即流入取血管。 3、 颈（股）动脉或颈（股）静脉采血，麻醉动物，剪去被毛，作颈静脉或劲动脉分离 术后采血 4、 摘眼球采血，采血时，用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球凸出，右手用弯头 镊子摘除眼球，迅速采集血液 病毒的纯化方法： 一般原则释放病毒至细胞外、去除细胞碎块、病毒悬液浓缩 1、 PEG 浓缩法，包括直接加入法、液体浓缩法、固体浓缩法 2、 超过滤法 3、 吸附法，有凝胶吸附法、红细胞吸附法 4、 超速离心法 中和试验及其应用 是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物， 使病毒与抗体相互反应， 再将混 合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。 通 常 以 100TCID50/ 单位体积或 100LD50/ 单位体积作为标准的病毒试验浓度 1、鉴定病毒、 2、分析病毒抗原的性质、 3、测定免疫血清的抗体效价和疫苗接种后的效果、 4、测定病人血清中的抗体，用于诊断病毒性疾病 鸡胚培养的优缺点 优点 1、 组织分化程度低，病毒易于繁殖 2、 来源充足，其本身很少携带病毒和细