分光光度法PPT课件.ppt

* 比色法和分光光度法 化学分析法 酸碱滴定法 配位滴定法 氧化还原滴定法 沉淀滴定法 重量分析法 容量分析法 仪器分析－－比色法和分光光度法 利用溶液颜色的深浅来测定溶液中有色物质的浓度，这种测定方法称为比色分析法。 用分光光度计进行的比色分析的方法称为分光光度法。 概述 目视比色,称为比色法。 —灵敏度高：测定下限可达10－5～10－6mol/L, 10-4%～10-5% 准确度高一般吸光光度法的相对误差为2-5%，对微量成分来说，还是比较满意的，因为在这种情况下，滴定分析法和重量法也不够准确了，甚至无法进行测定。 操作简便快速 应用广泛:几乎所有的无机离子和有机化合物都可直接或间接地用吸光光度法进行测定。 光度分析法的特点 1、光的基本性质 光具有波粒二象性，即波动性、粒子性。 根据波长的不同，可分为：p396 紫外光区：200nm ～ 400nm 可见光区：400nm ～ 750nm 红外光区：750nm ～ 1000μm 描述其波动性的主要参数是：波长λ，频率γ ，光速C。 三者间关系为： λγ＝C 物质对光的选择性吸收 具有同一波长的光称为单色光。 光的粒子性：如光电效应。 光子的能量（E）决定于光的频率和波长： 不同波长组成的光称为复合光。 白光（如日光）是复合光，是由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等光按适当的强度比例混合而成的，在400nm～750nm 范围的一种复合光。 2、物质对光的选择性吸收 物质为什么有颜色，其实质是什么？--物质本性、光 互补色光 如KMnO4吸收绿色光，因此KMnO4溶液呈现紫色。 物质的颜色 将不同波长的光透过某一固定的溶液，测量不同波长下溶液对光的吸光度，作图得到光吸收曲线,描述物质对不同波长光的吸收。 400 480 560 640 720 λnm 0.4 0.8 1.2 1.6 A KMnO4 溶液的吸收曲线 D C B A A、B、C、D代表不同浓度下的吸收曲线。 3 吸收曲线 λmax Ir Io It Ia 一束平行单色光照射透明溶液时，光的一部分被吸收，一部分透过溶液，一部分被器皿的表面反射。 光吸收的基本定律 1、朗伯—比尔定律 Io = Ia + It + Ir 若入射光强度为Io，吸收光的强度为Ia，透过光强度为It，反射光的强度为Ir，它们的关系是： 在吸光光度法中，测定时都是采用同样质量的比色皿，反射光的强度基本上是不变的，其影响可以相互抵消。 空白调零。 分光光度法中： Io = Ia + It 从上式可以看出： 溶液的透光度愈大，说明溶液对光的吸收愈小，相反，透光度愈小，说明溶液对光的吸收愈大. 透光度:透过光强度It与入射光强度Io之比,用 T 表示 吸光度：用 A表示 比例常数，与?、c、T有关。b：溶液厚度 朗伯定律：当 ?、c、T 一定时，溶液的吸光度与液层的厚度成正比。 比尔定律：当 ?、b 和 T一定时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。 　　朗伯—比尔定律（同时考虑溶液浓度和液层厚度的影响）一束平行单色光通过溶液，当?和T一定时，其吸光度与溶液的浓度和液层厚度成正比。 朗伯-比尔定律的适用条件 (1) 单色光: 应选用?max处或肩峰处测定 (2) 吸光质点形式不变：离解、络合、缔合会破坏线性关系， 应控制条件(酸度、浓度、介质等) (3) 稀溶液： 浓度增大，分子之间作用增强 当c用g·L-1表示，b用cm表示时，K用a表示，称为吸光系数，其单位为 L·(g.cm)-1 ，则： 2、比例常数K ①吸光系数a A = a b c ②摩尔吸光系数κ c用mol·L-1表示，b用cm表示时，K用κ表示，称为摩尔吸光系数，其单位为L·(mol.cm)-1。则： A =κb c κ在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。 κ越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。 κ105：超高灵敏； κ=(6～10）×104 ：高灵敏； κ2×104 ：不灵敏。 桑德尔(Sandell)灵敏度(灵敏度指数)用S来表示。 S是指当仪器的检测极限A=0.001时，单位截面积光程内所能检测出来的吸光物质的最低含量，其单位为μg·cm-2，S与κ及吸光物质摩尔质量M的关系为：S=M/κ 分光光度的灵敏度 【例】：有一浓度为1.0?g/ml Fe2+的溶液，以邻二氮菲显色后，在比色皿厚度为 2cm、波长510nm处测得吸光度为0