动物细胞培养和核移植技术.ppt

编辑ppt 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 这些技术的理论基础是什么？ 植物组织培养 和植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 动物细胞全能性如何？ 2.2 动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 动物细胞培养 概念:就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 培养过程： 注意关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 阅读课文44—46页相关内容 1、该技术实施的原理是什么？ 原理是细胞增殖 （有丝分裂） 。 思考： 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？ 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 胚胎组织或幼龄动物组织 贴壁生长 接触抑制 5%CO2维持培养液的pH P46讨论 剪碎 胰蛋白酶 10代以后，细胞增殖缓慢，细胞核型可能变化 贴壁生长 接触抑制 2、动物细胞培养过程： 转入培养液中进行原代培养 转入培养液中进行传代培养 制成细胞悬液 胰蛋白酶 制成细胞悬液 一、动物细胞培养 1、过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 （分解弹性纤维） 动物细胞培养与植物组织培养的比较： 植物细胞培养 动物细胞培养 比较项目 原 理 培养基 结 果 培养目的 细胞的 全能性 细胞的增殖 固体；营养 物质；激素 液体；营养 物质动物血清 培养成植株 培养成细胞 系或细胞株 快速繁殖，培养 无病毒植株等 获得细胞的 产物或细胞等 3、动物细胞培养的条件 （抗生素，更换培养液） ①无菌、无毒 ②营养：与体内基本相同 ③温度和PH ④气体环境 （95%空气 + 5% CO2 ） （36.5±0.5℃， 7.2-7.4） （合成培养基） 动物细胞培养技术应用 a、生产生物制品 b、与基因工程相结合 c、有毒物质的检测 培养目的 培养基特有成分 培养基性质 原理 动物细胞培养 植物组织培养 植物组织培养、动物细胞培养的比较 细胞的全能性 获得细胞或细胞产物 获得植株或细胞产品物 动物血清 植物激素 液体培养基 固体培养基 细胞增殖 克隆羊多利 二、细胞核移植技术和克隆动物 Ａ绵羊 Ｂ绵羊 乳腺细胞 卵细胞 重组胚胎 C母绵羊子宫 多莉羊 克隆羊多利的培育过程 细胞核移植 胚胎移植 (减Ⅱ中期卵母细胞) 动物细胞核移植技术和克隆动物 动物细胞核移植： 是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞 核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的 胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物） 分类： 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性困难