血液cml的突变检测.pptxVIP

CML的突变检测目录规范化突变检测的临床价值现有突变检测手段的局限和展望规范化突变检测的时机突变检测结果的临床应用目录规范化突变检测的临床价值现有突变检测手段的局限和展望规范化突变检测的时机突变检测结果的临床应用对TKI治疗发生耐药成为重要的临床问题JCO.2008;26:3358-63Leukemia. 2008;22:1963-6Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2006;219-25Blood. 2009;113:6315-21新诊断的CML-CP患者有1/4在伊马替尼治疗后不能获得持续缓解1,2耐药的类型3原发性耐药：从未获得初次缓解3可能导致治疗失败或未达次佳反应4对伊马替尼反应延迟增加疾病进展风险5继发性（获得性）耐药：患者获得了初次缓解，之后复发可能是疾病复发或者疾病进展突变是伊马替尼耐药的常见原因之一发生伊马替尼耐药的原因BCR-ABL依赖型基因突变（50%）基因扩增或蛋白过度表达（10%）BCR-ABL非依赖型SRC家族激酶其他通路激活其他因素Cancer Lett. 2007;249:121-32Blood. 2006;108:1809-20BCR-ABL突变位点1,2点突变可以引起BCR-ABL激酶区域氨基酸的改变。约90个不同的BCR-ABL突变已经被证实位于57个氨基酸残基上3Blood. 2011;118:1208-15JCO. 2011;29(suppl). Abstract 6510Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2007;371-83突变类型突变类型定义复合突变（Compound Mutation）同一个克隆中出现2个或以上的错义突变多克隆突变（Polyclonal Mutation）不同的克隆中出现同一个错义突变混合突变（Mixed Mutation）同一克隆中同时存在单个错义突变和2个或以上的复合突变优势突变（Predominant Mutations）通过直接测序可以检测的突变低水平突变（Low-level Mutations）需要通过亚克隆和测序，而不能通过直接测序检测的突变ASH 2013. Oral abstract 2720伊马替尼、尼洛替尼、达沙替尼常见突变位点BCR-ABL突变的危害和进行突变检测的意义规范化突变检测对于确定耐药愿意、选择合适的TKI、从而及时控制疾病进展非常重要！Leuk Lymphoma. 2007;52 (suppl1) :23-9Blood. 2006;108:1328-33Blood. 2006;108:2332-8点突变引起BCR-ABL激酶区域内的氨基酸的置换，破坏酪氨酸激酶抑制剂的结合部分，从而导致药物敏感性的丢失和疾病进展1CML突变频率的增加促使疾病从慢性期向急变期转变与伊马替尼相比，对二代TKI耐药的突变谱较窄2,3规范化突变检测需要达到的要求及时准确指导后续治疗目录规范化突变检测的临床价值现有突变检测手段的局限和展望规范化突变检测的时机突变检测结果的临床应用直接测序法是目前临床常规方法，但敏感度低J Mol Diagn. 2009;11:4-11Blood. 2002;99:3472-5目前最广泛使用的检测方法，美国和加拿大79%的实验室采用这一方法1优点：直接分析基因序列，可检测所有可能发生的KDM缺点：敏感度低（通量至少达到15%-20%），耗费人力，效率较低目前部分国内文献中测序未检测BCR-ABL激酶区全长，因此部分并不少见甚至高度耐药的突变（如F486S）可能会被漏检2其他突变检测方法指南仍推荐直接测序法作为标准检测方法NCCN指南慢性期：未能达到理想的首次缓解（3个月或6个月时未达到PCyR或BCR-ABL≤10%），或在12个月或18个月时未能达到CCyR任何血液学或细胞遗传学的缓解丧失BCR-ABL转录本水平增加1个对数级，同时丧失MMR疾病进展到加速期或急变期ELN指南推荐在患者出现疾病进展、治疗失败时通过传统直接测序法进行BCR-ABL激酶域突变检测，或点突变检测（非ABL1基因多态性检测）目录规范化突变检测的临床价值现有突变检测手段的局限和展望规范化突变检测的时机突变检测结果的临床应用规范化突变检测的时机早期发现BCR-ABL突变对后续治疗选择至关重要指南强调：一旦出现治疗反应欠佳或治疗失败，应当进行突变检测2013中国指南ELN 2013NCCN 2015治疗反应欠佳时治疗失败时丧失已获得的治疗反应时对于治疗失败的慢性期患者对于进展至加速期或急变期的患者当考虑从一种TKI转用另一种时慢性期在初始治疗反应不足时（3/6个月时未达到BCR-ABL≤10%或PCyR出现任何丧失治疗应答的征象（定义为血液学或细胞遗传学复发）BC