整理SDS-PAGE电泳常见问题解答.docx

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2021-12-01 发布于天津
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精精品文档精精品文档配胶缓冲液系统对电泳的影响？在 SDS－ PAGE 不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是 Tris－ HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,别离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris—甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其 pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而 CL 离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带, 蛋白分子就介于二者之间泳动. 由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度, 压着蛋白质分子聚集到一起, 浓缩为一狭窄的区带. 当样品进入别离胶后,由于胶中 pH 的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直