T细胞免疫功能检测平台的建立和在感染性疾病中的应用.pdfVIP

T 细胞免疫功能检测平台的建立和在感染性疾病 中的应用 T 细胞免疫功能检测平台的建立和在感染性疾病中的应用 李太生 中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和 医院感染内科 北京 100730 通信作者：李太生， E-mail ：litsh@263.net 细胞免疫功能在人体抗感染中发挥重要作用，各种感染性疾病的转归与细 胞免疫功能密切相关，尤其是与 T 淋巴细胞功能的关系更加密切。临床上缺乏 体内直接检测 T 细胞功能的手段，主要靠体外间接的方法来评估。如检测外周 血中 T 淋巴细胞及各亚群数量和比例、增殖功能及产生细胞因子的能力，主要 ， 方法有酶联免疫吸附法（ Enzyme-Linked immunosorbent assay ELISA ）、酶联 免疫斑点试验 （Enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT ）、流式细胞术 （Flow cytometry，FCM ），其中 FCM 鉴于其独特的优势在感染性疾病中应用广泛。 国际上很早就开展了用 FCM 检测 T 和 B 细胞各亚群来评估免疫功能并指 导 临 床 医 生 进 行 感 染 性 疾 病 的 诊 治 。 如 笔 者 早 年 在 法 国 巴 黎 学 习 的 Piti é-Salp étri ère 医院于 1993 年就在临床上常规开展 FCM 检测淋巴细胞亚群 以及淋巴细胞增殖功能的检测，帮助对感染性疾病诊疗的指导。而国内到目前 为止临床上也仅在少数医院开展了最基本的辅助 T 细胞和抑制 T 细胞的检测， 与国际上存在很大的差距。 我们协和医院感染科在 1999 年率先在国内建立了用 FCM 检测 T 、B 淋巴 细胞亚群的平台，并于 2001 年开始应用于临床，先后对人类免疫缺陷病毒感染 / 获得性免疫缺陷综合症（ Human immunodeficiencyviruses infection/Acquired immunodeficiency syndrome，HIV 感染/ 艾滋病（ AIDS ））、病毒性肝炎、严重 急性呼吸综合征（ Severe acute respiratory syndrome，SARS）等常见或新发传 染病进行了一系列的研究，现介绍如下： 一、 FCM 简介 FCM 是 20 世纪 70 年代发展起来的一种测量悬浮在液体中的细胞、 细胞器、 染色体或其他微粒的各种物理、化学、生物学、免疫学或遗传学等特性的动态 分析技术，以每秒数百、数千个细胞的速率进行多参数定性或定量分析 [1] 。应用 FCM 可测量细胞大小、 DNA/RNA 含量、细胞表面抗原表达等多种参数，是细 胞分析和分选的有力工具，其功能包括：细胞表型分析、 DNA 含量及细胞周期 分析、细胞内及核膜成分分析、细胞分选、自身抗体检测等 [2] 。在临床医学中可 广泛应用于肿瘤学、血液病、感染性疾病、免疫缺陷病、自身免疫病等多种疾 病的诊治。近年来 FCM 发展迅速，多色流式细胞术（ polychromatic flow cytometry, PFC）由 5 色（ 20 世纪 90 年代），发展到 13 色（ 2001 年），甚至 18 色（ 2006 年）的先进 PFC[3] 。目前临床上应用最广的是对