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Lowry法蛋白浓度测定试剂盒使用说明 货号：pc0030 规格：1000t（微孔） 保存：bsa蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月，-20℃保存有效期至少一年，其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存，folin酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。 福林酚a试剂福林酚a试剂福林酚B试剂（1n） pbs稀释液 BSA蛋白质标准品（5mg/ml） 100ml×25ml20ml30ml1ml 福林酚试剂法包括两步：第一步，在碱性条件下，蛋白质与铜反应形成蛋白质-铜络合物；第二步是复合物减少福林试剂产生深蓝色，颜色与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100μg/ml蛋白质。福林试剂的显色反应是由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起的，因此样品中的酚类、柠檬酸和巯基化合物会产生干扰。此外，由于酪氨酸和色氨酸的含量不同，不同蛋白质的颜色强度略有不同。 1.根据需要量，取适量folin酚甲试剂a和b按50:1混合，混合后有效期为24小时，过期失效。 2.按要求量取适量BSA标准品，用PBS稀释10倍至0.5mg/ml浓度。 若采用酶标仪法(96孔) 3.按照0,2,4,6,8,12,16,20ul向96孔板中添加标准，并添加PBS，直至达到20ul。 4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度)，加20ul到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点误差比较大，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 5.向每个孔中加入200ul制备的福林酚a试剂，轻轻摇动，充分混合，并在室温下放置10分钟。 6.各孔加入20微升folin酚乙试剂，迅速混匀，37℃放置30分钟。用酶标仪测定a650计算蛋白浓度。 如果使用分光光度计法（继续上述步骤2） 3.取八支（或者更多）5ml离心管，标号，按下表加入试剂。 4.搅拌均匀，在37℃下放置30分钟。用分光光度计测量a650，计算蛋白质浓度。 pc0001bsa标准品（5mg/ml） pc00155×G250（用于蛋白质定量） pc0021bca试剂 Pc0020bca蛋白浓度检测试剂盒 folin酚甲试剂a100ml×2 福林酚a试剂b5ml folin酚乙试剂(1n)20ml PBS稀释剂30ml bsa蛋白标准品(5mg/ml)1ml Pc0010 Bradford蛋白浓度测定试剂盒 r0010高效ripa组织/细胞快速裂解液 Pr1600预染色低分子量蛋白标记物 r0050核蛋白抽提试剂盒 p10154×蛋白加载缓冲液（含DTT） p1300sds凝胶制备试剂盒 d106010×电泳转移缓冲液 pe0010eclplus荧光检测试剂(ecl超敏发光液) 7（样品管1）200ul适当稀释的样品1 8（样品管2）200ul适当稀释的样品202ml ... 9（取样管3） 离心管号123456 标准蛋白 040ul80ul120ul160ul200ul Pbsolin酚a试剂 200ul2ml 160ul2ml 120ul2ml 80ul2ml 40ul2ml 混合均匀，在室温下放置10分钟 folin酚乙试剂