实验方法总结.pptxVIP

汇报人：刘晓玲 2014.12.22 TEL: Emil: xuelingzi@yeah.net;实验材料： 质粒R1308L\G1324S(载体是pQE-9) 大肠杆菌感受态细胞DH5α 大肠杆菌感受态细胞M15（含辅助质粒pREP4）——表达质粒;质粒谱图;质粒谱图;质粒谱图;实验步骤; 质粒提取 参照质粒小提试剂盒说明书操作。用超微量紫外/可见光分光光度计检测抽提的DNA浓度。 3.提取质粒转化大肠杆菌感受态细胞M15 表达载体 将上述提取的质粒转化大肠杆菌M15表达菌株，质粒DNA加入M15中。步骤如1。 4. 挑单菌落，扩大培养 5. 收集菌液，超声破碎，分离沉淀上清。 6.电泳 ;1.3 实验结果;实验结果; 电泳过程中分子迁移的规律，小分子走在前头，大分子滞后。电泳凝胶相当于凝胶过滤中的一个带孔胶粒。;原 理;实验原理;;实验原理;聚丙烯酰胺凝胶由通过N,N’-亚甲双丙烯酰胺交联的丙烯酰胺聚合链组成。 形成的孔径随双丙烯酰胺：丙烯酰胺比率的增加而变小。当比率为1：29时，可分离大小相差只有3%的多肽。 SDS聚丙烯酰胺凝胶的有效分离范围 （聚）丙烯酰胺% 线性分离范围（KDa）