实习二红细胞、网织红细胞检测.pptVIP

实验诊断实习二红细胞、网织红细胞检测;目的和要求;红细胞计数(red blood cell count);器材及试剂： ;操作 : ;稀释及混匀 先准备一清洁小试管，精确滴入红细胞稀释液 1.99 毫升，备用 将取好的血液立即挤入上述试管中，并来回吸取小量稀释液数次，以便将剩余在吸管中的血液全部洗净 摇动试管，充分混匀。此时血液被稀释 200 倍;充池 先将计数板及盖玻片擦干净，并将盖玻片复盖于计数池上面。 用吸管吸取己充分混匀的稀释血液一滴，滴于盖玻片的下方边缘处，稀释血液即充填入计数池中。注意勿发生气泡或使稀释血液流入计数池旁小槽内 静置 2 － 3 分钟，待红细胞完全下沉稳定后进行计数;计数 平放计数板于显微镜台上，先用低倍镜找到计数池的中央大方格。观察红细胞是否均匀，并调整至视野中间。 再转换高倍镜计数。镜下红细胞为圆形或盘形、略带黄色的细胞。如将上侧线和左侧线上的红细胞都计数在内，那么不要再将下侧和右侧线上的细胞计入 。计数时必须按一定方向和顺序，以免将红细胞重复计数或漏数。 计数 5 个中方格 ( 即四角的及中央的中方格 ) 由红细胞总共的个数，将其结果乘以 10 。即得每立方毫米血液中所含红细胞数目，再乘以 10 。即得每升血液中所含红细胞数目。; 每升血液中红细胞数目 = 五个中方格内红细胞个数× 5( 变为 0.1u1) × 10 ( 变为 1 u1) × 10 6 ( 变为 1L) × 200( 稀释倍数 )= 五个中方格内红细胞个数× 10 10 清洁仪器： 计数后，将盖玻片及计数板用水冲洗干净，再用绸或细布擦干 吸管先用蒸馏水，继用 95% 酒精，后用乙醚洗涤干净，保存备用;本卷须知;血红蛋白测定;[试剂与器材];该试剂应呈透明、淡黄色，pH在7.0～7.4之间，以蒸馏水作空白，在540nm比色，读数是0 溶液应放置棕色试剂瓶中，塞紧后保存于冰箱中〔但不宜冻结〕，至少可稳定数月 如发现试剂变绿、浑浊那么不能使用 其中非离子外表活性剂可加速溶血，缩短转化时间，防止血浆蛋白改变引起的浑浊;[实验步骤] ;计算： ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 血红蛋白〔g/L〕= 测定管光密度×〔64458/44000〕×251 ? ? ? ? ? ? = 测定管光密度A × 367.7 式中： 〔1〕64458 是目前国际公认的血红蛋白分子量 〔2〕44000 是国际血液学标准化委员会公布的血红蛋白摩尔吸光度 〔3〕251是稀释倍数 ;[方法评估] ;[本卷须知] ;[本卷须知] ;[本卷须知];除毒方法 取硫酸亚铁〔FeSO4·7H2O〕二份加NaOH一份，在研钵中研细，配成100g/L的悬液。每1000ml废液加上述除毒液5ml，放置3小时，不时搅拌，使剧毒的氰化钾成为无毒的亚铁氰化钾 废液参加等量的水，混合后每升加次氯酸铋液 ( 安替福化 )35 毫升，充分混匀后敞开容器，置室温 15 小时后，排入下水道;参考值－－屡次检查;临床意义;;RBC与Hb小结★;网织红细胞计数;取材：人的外周血液〔涂片〕 方法：煌焦油蓝活体染色法－－近年来还可通过某些血液自动分析仪及流式细胞术检测法进行网织红细胞计数 操作：取一滴血与煌焦油蓝染液混合，制成涂片 在油镜下，观察红细胞胞质内蓝色的丝网状结构－－计数1000个红细胞，求得其中网织红细胞百分数;染色及涂片要点;Φ8－9.5 μm，Wright染色呈嗜多色性红细胞 ;RC小结;The End!