霉菌和酵母计数PPT课件2.ppt

- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 乳酸菌检验 乳酸菌菌落总数的测定 乳酸菌菌落总数 检样在一定条件下培养后，所得1ml(g)检样中所含乳酸菌菌落的总数。 2019 - * 乳酸菌菌落总数的测定 检验操作步骤 1、　以无菌操作将经过充分摇匀的检样25mL(或25g)放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内作成1∶10的均匀稀释液。　 2、　用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)。　 3、 另取1mL灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液，如此每递增一次，即换用1支1mL灭菌吸管。　　 4、　选择2～3个以上适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。　 5、 稀释液移入平皿后，应及时将冷至50℃的乳酸菌计数培养基(改良TJA或改良MC)注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀。同时将乳酸菌计数培养基倾入加有1mL稀释液检样用的灭菌生理盐水的灭菌平皿内作空白对照，以上整个操作自培养物加入培养皿开始至接种结束须在20min内完成。　　 6、 待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养72±3h取出，观察乳酸菌菌落特征(见表1)，选取菌落数在30～300之间的平板进行计数。计算后，随机挑取5个菌落数进行革兰氏染色，显微镜检查并做过氧化氢酶试验。革兰氏阳性，过氧化氢酶阴性，无芽胞的球菌或杆菌可定为乳酸菌。根据证实为乳酸菌菌落计算出该皿内的乳酸菌数，然后乘其稀释倍数即得每毫升样品中乳酸菌数。例如，检样10－4的稀释液在改良TJA琼脂平板上，生成的可疑菌落为35个，取5个鉴定，证实为乳酸菌的是4个，则1mL检样中乳酸菌数为：　　 2019 - * 乳酸菌菌落总数的测定 乳酸菌的菌落特征 改良TJA： 1、杆菌：平皿底为黄色，菌落中等大小，微白色，湿润，边缘不整齐，直径3mm±1mm，如棉絮团装菌落。 2、球菌：平皿底为黄色，菌落光滑，湿润微白色，边缘整齐 改良MC： 1、杆菌：平皿底为粉红色，菌落较小，圆形，红色，边缘似星状，直径2mm±1mm，可有淡淡的晕。 2、球菌：平皿底为粉红色，菌落较小，圆形，红色，边缘整齐，可有淡淡的晕 2019 - * 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析 乳酸菌的鉴定 极少见还原硝酸盐 不液化明胶 不产生靛基质和硫化氢 多数无动力 过氧化氢酶阴性 革兰氏阳性的无芽胞杆菌或球菌 2019 - * - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -   食品卫生微生物学检验 GB/T 4789 -2003 1、霉菌和酵母计数 2、肉毒梭菌及肉毒毒素检验 3、罐头食品商业无菌的检验 4、乳酸菌检验 2019 - * 一、霉菌和酵母计数  1 范围 2 规范性引用文件 3 设备和材料 4 培养基和试剂 5 检验程序 6 操作步骤 2019 - * 霉菌和酵母菌及其检验 二、检验方法： 　　霉菌和酵母的计数方法，与菌落总数的测定方法基本相似。主要步骤为： 　　将样品制作成10倍梯度的稀释液，选择3个合适的稀释度，吸取1mL于平皿，倾注培养基后，培养观察，计数。 　　对霉菌的计数，还可以采用显微镜直接镜检计数的方法。 2019 - * 霉菌和酵母菌及其检验 三、程序: 　　1．样品的处理。为了准确测定霉菌和酵母数，真实反映被检食品的卫生质量，首先应注意样品的代表性。对大的固体食品样品，要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料，再混合磨碎。如样品不太大，最好把全部样品放到灭菌均质器杯内搅拌2min。液体或半固体样品可用迅速颠倒容器25次来混匀。 　　2．样品的稀释：为了减少榈稀释倍数的误差，在连续递增稀释时，每一稀释度应更换一根吸管。在稀释过程中，为了使霉菌的孢子充分散开，需用灭菌吸管反复吹吸50次。 　　3．培养基的选择：在霉菌和酵母计数中，主要使用以下几种选择性培养基。 　　马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（PD