合肥万物生物ATP 染色实验报告.pdf免费

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2022-05-11 发布于安徽
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合肥万物生物ATP 染色实验报告.pdf

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ATP 染色实验报告一、实验器材及试剂 1、实验器材名称厂家型号冰冻切片机 Thermo CRYOSTARNX50 切片刀上海徕卡仪器有限公司 LEICA 819 防脱载玻片 Wanwu G6004 正置光学显微镜日本尼康 NIKON ECLIPSE E100 物成像系统日本尼康 NIKON DS-U3 万 2、主要实验试剂试剂名称肥厂家货号 OCT 包埋剂 Wanwu G6059-110ML Tris碱 Sigma V900483 氯化钙国药集团化学试剂有限公司合 ATP 钠盐 615B025 Solarbio 盐酸硝酸钴国药集团化学试剂有限公司物国药集团化学试剂有限公司硫化铵国药集团化学试剂有限公司二甲苯国药集团化学试剂有限公司无水乙醇国药集团化学试剂有限公司万 100092683 二、染液配制： 2%CaCl 溶液：5g 无水CaCl +250ml 超纯水 2 2 肥 2%硝酸钴溶液：5g 硝酸钴+250ml 超纯水母液配制：Tris碱5g+氯化钙0.499g+蒸馏水定容至250ml 0.1mol/LHCL：1mlHCL+11ml 超纯水混匀后稀释 10倍合 PH10.4孵育液：取20ml 母液，用巴氏吸管取0.1mol/L 的HCL3 滴加入，混匀，PH 约为10.4 PH9.4 孵育液：取20ml 母液加入30mg 的ATP 钠盐，混匀，用巴氏吸管取0.1mol/L 的 HCL25滴加入，混匀，PH 约为9.4。三、染色步骤： 1、未经固定的新鲜组织冰冻切片自然晾干，组化笔画圈圈住组织，滴加PH10.4 的孵育液孵育5min，倾去孵育液，不水洗直接滴加PH 9.4 的孵育液孵育30min，室温下进行并加盖。 2、倾去孵育液，切片直接依次入3缸CaCL 溶液浸染，每次2min。 2 3