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植物组织培养技术 1958年美国科学家斯图尔德取胡萝卜韧皮部的一些细胞,培养成了一株胡萝卜。 离体 细胞分化的实质: 基因的选择性表达 1、理论基础: 细胞的全能性 1958年美国科学家斯图尔德取胡萝卜韧皮部的一些细胞,培养成了一株胡萝卜。 外植体 已分化 未分化 脱分化 愈伤组织 再分化 外植体消毒 移栽 3、实验——胡萝卜的组织培养 取材 接种 愈伤组织 试管苗 ①离体 ②营养物质:水,无机盐,小分子有机物(蔗糖)等 ④其他外界条件:温度、PH、光照、无菌等 ③激素 植物组织培养的条件? 为什么选择形成层?选择其他部位可以吗?为什么? 细胞全能性的大小差异: ▲受精卵生殖细胞体细胞; ▲分化程度低的分化程度高的; ▲高度分化的动物细胞的全能性受到限制。 外植体消毒 移栽 3、实验——胡萝卜的组织培养 取材 接种 愈伤组织 试管苗 为什么要更换培养基,说明了什么? 培养基的主要组成部分: ①营养物质 (水、无机盐、小分子有机物) ②激素(诱导脱分化,调节再分化) ③琼脂(支持物) 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 ①当植物细胞分裂素与生长素的浓度比等于1时, ; ②当植物细胞分裂素与生长素的浓度比小于1时, ; ③当植物细胞分裂素与生长素的浓度比大于1时, 。 资料分析1:某植物组织培养的再分化阶段所用培养基中,含有细胞分裂素和生长素。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比,未分化细胞群的变化情况如图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系: 未分化细胞群分化形成根 未分化细胞群分化形成芽 未分化细胞群经分裂 形成愈伤组织 在植物组织培养中,脱分化可用的激素组合是实验 中的激素浓度关系;再分化可用的激素组合是实验 中的激素浓度关系 资料分析2:下表是培养基中细胞分裂素和生长素在不同比例时的实验结果,请分析回答: 1和3 2和4 结论:两种激素的用量比例影响植物细胞的发育方向。 此外,植物激素的浓度、使用的先后顺序等也会影响实验的结果。 外植体消毒 移栽 3、实验——胡萝卜的组织培养 取材 接种 愈伤组织 试管苗 如何设计实验:探究光照条件对细胞分化方向的影响? 实验材料: 自 变 量: 对比实验设置: 愈伤组织 光照条件 (对照原则 、唯一变量原则) 资料分析3:某课外小组同学用胡萝卜愈伤组织进行了两组实验:甲组在光下培养,乙组在暗处培养。(其他条件相同且适宜)。 1个月后,观察植物体生长、分化情况,结果如下表: 培养条件 光下 暗处 实验结果 正常生长,分化 正常生长,不分化 由此得出的结论是: 。 光能够促进细胞分化 脱分化避光,再分化需光照: (光抑制愈伤组织的形成,但能促进芽的分化,再分化阶段叶绿体的合成需要光) 课 堂 小 结 1、理论基础:细胞的全能性 3、培养条件: 植物体 移栽 脱分化 再分化 愈伤组织 根、芽 (试管苗) 2、基本流程: 4、组织培养的概念: 植物组织培养就是在 和 条件下,将 ,培养在 上,给予适宜的培养条件,诱导其产生 ,最终形成完整的植株。 无菌 人工控制 人工配制的培养基 愈伤组织、丛芽 【练习1】(双选)下列有关植物组织培养的叙述中,正确的是( ) A.花药、胚不能作为组织培养的材料 B.植物细胞具有全能性 C.外植体是指用于培养的植物器官、组织或细胞 D.脱分化指体内已分化的细胞形态、结构和功能产生改变的过程 BC 【练习2】要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,不需要( ) A.具有完整细胞核的细胞 B. 导入外源基因 C.离体状态 D.一定的营养物质和激素 B 【练习4
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