2022年高考生物必刷第38题 现代生物科技专题（解析版）.docxVIP

2022年高考生物必刷题 第38题 现代生物科技专题 1．小麦纯合自交系川农16具有穗大、粒多、抗病等优良特性，可通过导入抗除草剂基因bar使其获得抗除草剂性状，具体技术路线如图所示。其中抗除草剂基因bar来源于野生型植物甲，抗草甘膦基因aroA是选择标记基因，报告基因能在特定情况特定组织中表达。 （1）图中构建表达载体的过程需要用两种不同的限制酶切割，比用一种限制酶切割的优点是_______。很多启动子具有物种特异性，在图中Ti质粒的T-DNA中插入除草剂抗性基因bar时其上游启动子应该选择_______。 A．野生植物甲启动子 B．农杆菌启动子 C．小麦川农16的启动子 （2）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选已转化的愈伤组织，需使用含_________的选择培养基。但在转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_________。 ①无农杆菌附着的未转化愈伤组织 ②无农杆菌附着的转化愈伤组织 ③农杆菌附着的未转化愈伤组织 ④农杆菌附着的转化愈伤组织 （3）转化后经筛选的愈伤组织需转换培养基继续培养，此时培养基需添加的植物激素为________，部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是___________。培养获得的转基因植株不一定稳定遗传，须将转基因植株进行__________，继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合系。 （4）T-DNA序列可随机插入到愈伤组织DNA中导致插入位点基因功能丧失。上述实验中偶然获得了一个突变体F，产量明显低于小麦川农16。研究者用某种限制酶处理突变体F的DNA，得到图2，若以此为模板进行PCR扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，需选择的引物是__________。 【答案】 （1） 防止目的基因末端任意链接、防止目的基因自身环化、防止目的基因反向连接 C （2） 除草剂 ②④ （3） 生长素、细胞分裂素 植物细胞具有全能性，芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化 自交 （4）①④ 【分析】 基因工程技术的基本步骤： (1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定： 分子水平上的检测： ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-- DNA分子杂交技术； ②检测目的基因是否转录出了mRNA- -分子杂交技术； ③检测目的基因是否翻译成蛋白质一-抗原一抗体杂交技术。 个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 （1） 构建表达载体的过程需要用两种不同的限制酶切割，比用一种限制酶切割的优点是防止目的基因末端任意链接、防止目的基因自身环化、防止目的基因反向连接。 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，用于驱动基因的转录，结合题意可知，该基因工程是将野生型植物甲的抗除草剂基因bar导入小麦，想让抗除草剂基因bar在小麦中成功表达，所以应当选择小麦川农16的启动子，C正确。 故选C。 （2） 获得抗除草剂转基因小麦，则筛选转化的愈伤组织，需使用含除草剂的选择培养基。 含有内含子的报告基因位于农杆菌Ti质粒的T-DNA中，无农杆菌附着的未转化愈伤组织不含内含子的报告基因，不会出现蓝色；不论有无农杆菌附着，转化愈伤组织中都含有Ti质粒，含内含子的报告基因，出现蓝色；农杆菌附着的未转化愈伤组织，含内含子的报告基因位于农杆菌中，农杆菌属于原核生物，其中的报告基因不能正确表达，不会出现蓝色。故选②④。 （3） 转化后经筛选的愈伤组织需转换培养基继续培养，此时培养基需添加的植物激素为生长素、细胞分裂素。 植物植株培养过程中，生长素及其类似物在植物组织培养中诱导生根，细胞分裂素及其类似物在植物组织培养中诱导生芽。由于芽的生长过程中会产生内源性的生长素，所以部分接种在无激素培养基上的芽也能长根。 培养获得的转基因植株不一定稳定遗传，须将转基因植株进行自交，继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合系。 （4） 研究者用某种限制酶处理突变体的DNA，露出相同的粘性末端， 用DNA连接酶将两端的黏性末端连接成环，以此为模板，