细菌的接种及分离培养.pptVIP

细菌的接种及分离培养 第1页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 一、目的要求 1、掌握细菌的一般培养法； 2、掌握细菌培养的接种方法，进一步熟悉无菌操作技术。 第2页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 二、实验材料 菌种：葡萄球菌培养物、大肠杆菌培养物、枯草杆菌培养物、变形杆菌培养物； 实验器材：接种环、接种针、酒精灯； 培养基：普通琼脂平板、试管斜面、液体培养基、半固体培养基； 第3页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 细菌接种的要求 无菌操作 细菌检验的操作需在无菌室或超净工作台内进行。 无菌室、超净工作台使用前后需进行消毒。 细菌检验使用的物品使用前后需严格灭菌 标本的采集 无菌试管、烧瓶的使用 第4页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃涂棒等。 图－6 接种工具 第5页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 第6页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 细菌接种的基本程序 灭菌接种环 沾取标本 接种 灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境 三、细菌的接种法 第7页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 （二）细菌的琼脂平板分离划线接种法 菌种：葡萄球菌、大肠埃希菌等普通琼脂培养物； 培养基：固体平板培养基； 用途 ：该法主要是借助划线而将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌能固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。 第8页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 细菌的分离—平板划线法 1.分区划线法： 2.连续划线法： 第9页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 1.分区划线法 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环 第10页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 2.连续划线法 第11页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 （三）细菌的纯种接种法 当细菌分离成纯种后，常需要接种到相关的培养基中，以测试其各种生物学性状。一般可用斜面、半固体、液体培养基来检验细菌的培养特性，相应培养基的接种方法有三种。 琼脂斜面接种法 液体接种法 半固体接种法 第12页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 1、琼脂斜面接种法 菌种：葡萄球菌、大肠埃希菌等普通琼脂培养物； 培养基：斜面固体培养基； 用途：扩增细菌、保存菌种；或用于观察其某些生化特性。 第13页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 琼脂斜面培养基接种法 第14页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 2、液体接种法 菌种：葡萄球菌或大肠埃希菌、枯草杆菌等普通琼脂培养物； 培养基：液体培养基； 接种方法：液体接种法。 从斜面菌种接入液体培养液；从液体培养液接入液体培养液； 用途：扩增细菌，用于观察细菌的生长特性或测定其生化特性。 第15页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五 3、半固体穿种接种法 菌种：葡萄球菌、大肠埃希菌等普通琼脂培养物； 培养基：半固体培养基 接种方法：穿刺接种法。用接种针垂直地穿入培养基中心至底部；然后沿着原接种线将针拔出。 用途：检验细菌的运动性或观察细菌的生化反应。 第16页，共22页，2022年，5月20日，19点24分，星期五